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COX
Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Burkitt-Lymphom
Synonyme
LCL (DR3)

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COX

Cell line · Artikelnummer 302138

Die COX-Zelllinie ist eine Referenz-B-Lymphoblastoid-Zelllinie (B-LCL), die von einem menschlichen Spender stammt und mit dem Epstein-Barr-Virus (EBV) transformiert wurde. Sie wird häufig...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die COX-Zelllinie ist eine Referenz-B-Lymphoblastoid-Zelllinie (B-LCL), die von einem menschlichen Spender stammt und mit dem Epstein-Barr-Virus (EBV) transformiert wurde. Aufgrund ihrer Aufnahme in die Panels der International Histocompatibility Working Group (IHWG) wird sie häufig in der Immunogenetik und Histokompatibilitätsforschung verwendet. Die COX-Zelllinie repräsentiert einen spezifischen Haplotyp des Haupthistokompatibilitätskomplexes (MHC), HLA-A1-B8-Cw7-DR3-DQ2, der mit der Anfälligkeit für Autoimmunerkrankungen wie Typ-1-Diabetes, systemischem Lupus erythematodes und Myasthenia gravis in Verbindung gebracht wird. Dieser Haplotyp zeichnet sich durch ein hohes Maß an Kopplungsungleichgewicht aus und macht die Zelllinie zu einem wichtigen Modell für die Untersuchung von MHC-bezogenen genetischen Assoziationen.

Die genomische Sequenz des COX-Haplotyps wurde im Rahmen des MHC-Haplotyp-Projekts vollständig charakterisiert. Er erstreckt sich über ca. 4,8 Mb und umfasst die Regionen der Klasse I, II und III des MHC sowie die erweiterte Klasse-I-Region. Bei der detaillierten Sequenzierung wurden über 16 000 Einzelnukleotid-Polymorphismen (SNPs) und zahlreiche strukturelle Variationen festgestellt, die Einblicke in die genetische Architektur dieser Region ermöglichen. Die umfassende MHC-Charakterisierung der COX-Zelllinie macht sie zu einer wichtigen Ressource für das Verständnis der Funktion des Immunsystems und der genetischen Grundlagen von HLA-assoziierten Krankheiten.

In der Forschung wird die COX-Zelllinie für die Feinkartierung von krankheitsassoziierten Loci innerhalb des MHC sowie für funktionelle Studien zur Antigenverarbeitung und -präsentation verwendet. Ihr gut definiertes genetisches Profil ermöglicht vergleichende Studien mit anderen MHC-Haplotypen, was zur Identifizierung von Krankheitsrisikovarianten und potenziellen therapeutischen Zielen beiträgt. Darüber hinaus ist die Zelllinie an der Bewertung neuer Sequenzierungs- und Genotypisierungstechnologien beteiligt und dient als Standardreferenz in immungenetischen Studien.

Gewebe
Peripheres Blut
Krankheit
Burkitt-Lymphom
Synonyme
  • LCL (DR3)

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Merkmale

Morphologie
Runde Zellen
Zelltyp
B-Lymphoblasten

04Bezeichner

Quellenangabe
COX (Cytion Katalognummer 302138)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_E534

05Expression und Anfälligkeit

Viren
Umgewandelt durch EBV

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% hitzeinaktiviertem FBS
Subkultivierung
Homogenisieren Sie die Zellsuspension im Kolben vorsichtig durch Auf- und Abpipettieren und entnehmen Sie dann eine repräsentative Probe, um die Zelldichte pro ml zu bestimmen. Verdünnen Sie die Suspension mit frischem Kulturmedium auf eine Zellkonzentration von 1 x 105 Zellen/ml und füllen Sie die angepasste Suspension zur weiteren Kultivierung in neue Kolben.
Aussaatdichte
5 x 105 Zellen/cm²
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 105 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Einfriervorgang erholen lassen und anhaften lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
Alter nicht spezifiziert
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch