Preskoči na vsebino
COX
Tkivo
Periferna kri
Bolezen
Burkittov limfom
Sinonimi
LCL (DR3)

Dokumenti

COX

Cell line · Številka izdelka 302138

Celična linija COX je referenčna B-limfoblastoidna celična linija (B-LCL), pridobljena iz človeškega darovalca in transformirana z virusom Epstein-Barr (EBV). Pogosto se...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija COX je referenčna limfoblastoidna celična linija B (B-LCL), pridobljena od človeškega darovalca in spremenjena z virusom Epstein-Barr (EBV). Pogosto se uporablja v imunogenetiki in raziskavah histokompatibilnosti, saj je vključena v panele Mednarodne delovne skupine za histokompatibilnost (IHWG). Celična linija COX predstavlja poseben haplotip glavnega histokompatibilnostnega kompleksa (MHC), HLA-A1-B8-Cw7-DR3-DQ2, ki je povezan z dovzetnostjo za avtoimunske bolezni, kot so diabetes tipa 1, sistemski lupus eritematozus in miastenija gravis. Ta haplotip se odlikuje po visoki stopnji neravnovesja povezav, zato je celična linija bistven model za preučevanje genetskih povezav, povezanih z MHC.

Genomsko zaporedje haplotipa COX je bilo v okviru projekta MHC Haplotype Project v celoti opisano. Obsega približno 4,8 Mb in vključuje regije razreda I, II in III MHC ter razširjeno regijo razreda I. Podrobno sekvenciranje je razkrilo več kot 16 000 polimorfizmov z enim nukleotidom (SNP) in številne strukturne variacije, kar omogoča vpogled v genetsko zgradbo te regije. Celovita karakterizacija MHC celične linije COX je ključni vir za razumevanje delovanja imunskega sistema in genetske osnove bolezni, povezanih s HLA.

V raziskavah se celična linija COX uporablja za natančno kartiranje z boleznimi povezanih lokusov znotraj MHC ter za funkcionalne študije obdelave in predstavitve antigenov. Njen dobro opredeljen genetski profil omogoča primerjalne študije z drugimi haplotipi MHC, kar pomaga pri identifikaciji različic tveganja za bolezni in potencialnih terapevtskih ciljev. Poleg tega je celična linija vključena v ocenjevanje novih tehnologij sekvenciranja in genotipizacije ter služi kot standardna referenca v imunogenetičnih študijah.

Tkivo
Periferna kri
Bolezen
Burkittov limfom
Sinonimi
  • LCL (DR3)

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
2

03Značilnosti

Morfologija
Okrogle celice
Vrsta celice
Limfoblast B

04Identifikatorji

Navajanje vira
COX (kataloška številka Cytion 302138)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_E534

05Izražanje in dovzetnost

Virusi
Preoblikovan z EBV

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % toplotno aktiviranega FBS
Preusmeritev v drugo kulturo
Nežno homogenizirajte celično suspenzijo v kolbi s pipetiranjem navzgor in navzdol, nato odvzemite reprezentativni vzorec za določitev gostote celic na ml. Suspenzijo razredčite, da dosežete koncentracijo celic 1 x 105 celic/ml s svežim kultiviranim medijem, in prilagojeno suspenzijo razdelite v nove kolbe za nadaljnje gojenje.
Gostota setve
5 x 105 celic/cm2
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 105 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Nedoločena starost
Etnična pripadnost
Kavkaški