NG108-15

קו התאים NG108-15 הוא קו תאים היברידי מסוג נוירובלסטומה × גליומה, שתואר היטב, אשר נוצר על ידי מיזוג בין שיבוט הנוירובלסטומה של עכבר N18TG2 לבין שיבוט הגליומה של חולדה C6-BU-1. מיזוג זה מביא ליצירת סוג תאים המבטא באופן בולט מגוון תכונות הדומות לאלו של נוירונים, מה שהופך את NG108-15 למודל נפוץ במחקר נוירוביולוגי ונוירופרמקולוגי. התאים ההיברידיים מפגינים רמת רגישות חשמלית גבוהה ומבטאים אנזימים עצביים כגון אצטיל-טרנספראז של כולין, המאפשרים סינתזה, אחסון ושחרור של אצטילכולין. תאים אלה יוצרים שלוחות נרחבות ומסוגלים לייצר פוטנציאל פעולה בתגובה לגירוי חשמלי או כימי.

הוכח שתאי NG108-15 יוצרים סינפסות כימיות תפקודיות עם תאי שריר, כולל מיוטובים עובריים ראשוניים של עכברים וקווי מיוטובים משובטים כגון G-8. במערכות תרבית משותפת, תאי NG108-15 יכולים לעצבב מיוטובים, ומייצרים פוטנציאלים סינפטיים בתגובה לפוטנציאלי פעולה מעוררים. תגובות אלו תלויות באצטילכולין וניתן לחסום אותן באמצעות d-tubocurarine, דבר המאשר את האופי הקולנירגית של הסינפסות. יש לציין כי יעילות ההעברה הסינפטית משתנה אך נותרת משמעותית מבחינה פיזיולוגית, כאשר חלק ניכר מפוטנציאלי הפעולה ההיברידיים מצליחים לגרום לדה-פולריזציה של השרירים. התגובות הפוסט-סינפטיות מדומות באופן הדוק על ידי יישום יונופורטי של אצטילכולין, דבר התומך עוד יותר בזהותן הקולנירגית.

תאי NG108-15 הם תאים גדולים, דמויי נוירונים, בעלי שלוחות ומורפולוגיה דמוית נוירובלסטומה. הם מציגים מאפיינים קריוטיפיים של עכברים וחולדות ומראים דפוסים היברידיים של איזואנזימים התואמים את הרקע הגנטי המעורב שלהם. תאים אלה שומרים על פנוטיפים דמויי נוירונים גם במספר מעברים גבוה יותר, אם כי תכונות מסוימות, כגון פעילות אצטיל-טרנספראז של כולין, עשויות לרדת עם הזמן. בסך הכל, תאי NG108-15 נחשבים למודל in vitro אמין לחקר התמיינות עצבית, העברת אותות עצביים וסינפטוגנזה, במיוחד בהקשר של איתות בתיווך אצטילכולין.

מדיום: המדיום הבסיסי עבור קו תאים זה הוא מדיום איגל המותאם של דולבקו (GIBCO/InVitrogen, מס' קטלוגי 12100-061, DMEM ללא פירובט נתרן). להכנת מדיום הגידול המלא, יש להוסיף את המרכיבים הבאים למדיום הבסיסי:

• 0.1 mM היפוקסנטין (ריכוז סופי)
• 400 ננומול אמינופטרין (ריכוז סופי)
• 0.016 mM תימידין (ריכוז סופי)
• 10% סרום עגלי (ריכוז סופי)
• 1.5 g/L סודיום ביקרבונט

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו