NG108-15

Rakuliin NG108-15 on hästi iseloomustatud neuroblastoomi ja glioomi hübriidrakuliin, mis on saadud hiire neuroblastoomi klooni N18TG2 ja roti glioomi klooni C6-BU-1 ühendamisel. Selle ühendamise tulemusena tekib rakutüüp, mis väljendab tugevalt mitmesuguseid neuronilaadseid omadusi, mistõttu on NG108-15 laialdaselt kasutatav mudel neurobioloogilistes ja neurofarmakoloogilistes uuringutes. Hübriidrakkudel on kõrge elektriline erutuvus ja need ekspresseerivad neuronaalseid ensüüme, nagu koliiniatsetüültransferaas, mis võimaldab atsetüülkoliini sünteesi, ladustamist ja vabanemist. Need rakud moodustavad ulatuslikke protsesse ja on võimelised tekitama aktsioonipotentsiaale vastusena elektrilisele või keemilisele stimulatsioonile.

On näidatud, et NG108-15 rakud moodustavad funktsionaalseid keemilisi sünapseid lihasrakkudega, sealhulgas nii esmaste hiire embrüonaalsete müotubustega kui ka kloonitud müotubuste liinidega, nagu G-8. Ko-kultuuri süsteemides suudavad NG108-15 rakud innerveerida müotubuseid, tekitades sünaptilisi potentsiaale vastusena esile kutsutud aktsioonipotentsiaalidele. Need reaktsioonid sõltuvad atsetüülkoliinist ja neid saab blokeerida d-tubokurariiniga, mis kinnitab sünapside kolinergilist olemust. Tuleb märkida, et sünaptilise ülekande efektiivsus varieerub, kuid jääb füsioloogiliselt oluliseks, kusjuures märkimisväärne osa hübriid-aktsioonipotentsiaalidest indutseerib edukalt lihaste depolarisatsiooni. Postsinaptilisi reaktsioone jäljendab hästi atsetüülkoliini iontoforeetiline manustamine, mis toetab veelgi nende kolinergilist olemust.

NG108-15 rakud on suured, neuronitaolised rakud, millel on väljasopistused ja neuroblastoomi sarnane morfoloogia. Neil on nii hiire kui ka roti kariotüübilisi tunnuseid ning nad näitavad hübriidseid isotsüümimustreid, mis on kooskõlas nende segatud geneetilise taustaga. Need rakud säilitavad neuronitaolised fenotüübid isegi suurema passaažiarvu juures, kuigi mõned omadused, nagu koliiniatsetüültransferaasi aktiivsus, võivad aja jooksul väheneda. Üldiselt peetakse NG108-15 rakke usaldusväärseks in vitro mudeliks neuronite diferentseerumise, neurotransmissiooni ja sünaptogeneesi uurimiseks, eriti atsetüülkoliini vahendatud signaalimise kontekstis.

Kasvatuskeskkond: Selle rakuliini põhikeskkonnaks on Dulbecco modifitseeritud Eagle’i keskkond (GIBCO/InVitrogen katalooginumber 12100-061, DMEM ilma naatriumpüruvaadita). Täieliku kasvatuskeskkonda valmistamiseks lisage põhikeskkonnale järgmised komponendid:

• 0,1 mM hüpoksantiin (lõplik kontsentratsioon)
• 400 nM aminopteriin (lõppkontsentratsioon)
• 0,016 mM tümiin (lõppkontsentratsioon)
• 10% loote veise seerumit (lõplik kontsentratsioon)
• 1,5 g/l naatriumvesinikkarbonaati

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest