NG108-15

NG108-15細胞株は、マウス神経芽細胞腫クローンN18TG2とラットグリオーマクローンC6-BU-1を融合させて樹立された、十分に特徴が解明されている神経芽細胞腫×グリオーマハイブリッド細胞株である。この融合により、一連の神経細胞様特性を強力に発現する細胞タイプが得られ、NG108-15は神経生物学および神経薬理学の研究において広く利用されているモデルとなっている。 このハイブリッド細胞は高い電気的興奮性を示し、コリンアセチルトランスフェラーゼなどの神経酵素を発現しているため、アセチルコリンの合成、貯蔵、および放出が可能である。これらの細胞は広範な突起を形成し、電気的または化学的刺激に応答して活動電位を発生させることができる。

NG108-15細胞は、初代マウス胚性筋管細胞やG-8などのクローン筋管細胞株を含む筋細胞と、機能的な化学シナプスを形成することが示されている。共培養系において、NG108-15細胞は筋管細胞を神経支配し、誘発された活動電位に応答してシナプス電位を生成することができる。 これらの反応はアセチルコリンに依存しており、d-チューブカリンによって阻害されることから、シナプスのコリン作動性であることが確認されている。特に、シナプス伝達の効率にはばらつきがあるものの、生理学的に有意なレベルを維持しており、ハイブリッド活動電位の相当な割合が筋肉の脱分極を成功裏に誘導している。シナプス後反応は、アセチルコリンのイオントフォレーシスによる投与によって忠実に再現され、そのコリン作動性という性質をさらに裏付けている。

NG108-15細胞は、突起を持ち、神経芽細胞腫に似た形態を示す大型の神経細胞様細胞である。これらはマウスおよびラットの両方の核型特徴を示し、その混合遺伝的背景と一致するハイブリッドなアイソザイムパターンを示す。これらの細胞は、培養継代数が増加しても神経細胞様表現型を維持するが、コリンアセチルトランスフェラーゼ活性などの一部の特性は、時間の経過とともに低下する可能性がある。 総じて、NG108-15細胞は、特にアセチルコリンを介したシグナル伝達という文脈において、神経分化、神経伝達、およびシナプス形成を研究するための堅牢なin vitroモデルと考えられている。

培地： この細胞株のベース培地は、ダルベッコ改良型イーグル培地 （GIBCO/InVitrogen カタログ番号 12100-061、ピルビン酸ナトリウムを含まない DMEM）です。 完全な増殖培地を作るには、ベース培地に以下の成分を加えます：

• 0.1 mM ヒポキサンチン（最終濃度）
• 400 nM アミノプテリン（最終濃度）
• 0.016 mM チミジン（最終濃度）
• 10% 胎児牛血清（最終濃度）
• 1.5 g/L 炭酸水素ナトリウム

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。