NG108-15

Клетъчната линия NG108-15 е добре охарактеризирана хибридна клетъчна линия от типа невробластома × глиома, получена чрез сливане на мишия невробластомен клон N18TG2 с плъшия глиомен клон C6-BU-1. Това сливане води до клетъчен тип, който проявява редица невроподобни свойства, което прави NG108-15 широко използван модел за невробиологични и неврофармакологични изследвания. Хибридните клетки проявяват висока степен на електрическа възбудимост и експресират невронни ензими като холин ацетилтрансфераза, което позволява синтеза, съхранението и освобождаването на ацетилхолин. Тези клетки образуват обширни израстъци и са способни да генерират акционни потенциали в отговор на електрическа или химична стимулация.

Доказано е, че клетките NG108-15 образуват функционални химични синапси с мускулни клетки, включително както първични ембрионални миотуби от мишки, така и клонални линии миотуби като G-8. В системи за съвместна култура клетките NG108-15 могат да инервират миотубите, произвеждайки синаптични потенциали в отговор на провокирани акционни потенциали. Тези реакции зависят от ацетилхолина и могат да бъдат блокирани от d-тубокурарин, което потвърждава холинергичната природа на синапсите. Забележително е, че ефективността на синаптичната трансмисия варира, но остава физиологично значима, като значителна част от хибридните акционни потенциали успешно предизвикват мускулна деполяризация. Постсинаптичните реакции се имитират точно чрез йонофоретично приложение на ацетилхолин, което допълнително подкрепя тяхната холинергична идентичност.

Клетките NG108-15 са големи, подобни на неврони клетки с израстъци и морфология, подобна на невробластома. Те проявяват както кариотипни характеристики на мишки, така и на плъхове и показват хибридни изозимни модели, съответстващи на смесения им генетичен произход. Тези клетки запазват фенотипи, подобни на неврони, дори при по-висок брой пасажи, въпреки че някои свойства, като активността на холин ацетилтрансферазата, могат да намалеят с времето. Като цяло, клетките NG108-15 се считат за надежден in vitro модел за изучаване на невронната диференциация, невротрансмисията и синаптогенезата, особено в контекста на ацетилхолин-медиираната сигнализация.

Среда: Основната среда за тази клетъчна линия е модифицираната среда на Дълбеко (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) (GIBCO/InVitrogen, каталожен № 12100-061, DMEM без натриев пируват). За да се приготви пълната среда за отглеждане, към основната среда се добавят следните компоненти:

• 0,1 mM хипоксантин (крайна концентрация)
• 400 nM аминоптерин (крайна концентрация)
• 0,016 mM тимидин (крайна концентрация)
• 10% фетално телешко серум (крайна концентрация)
• 1,5 g/L натриев бикарбонат

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация