NG108-15

سلسلة الخلايا NG108-15 هي سلسلة خلايا هجينة من ورم الخلايا العصبية الأولية × الورم الدبقي، تم توصيفها بدقة، وقد تم الحصول عليها عن طريق دمج نسخة ورم الخلايا العصبية الأولية N18TG2 المأخوذة من الفئران مع نسخة الورم الدبقي C6-BU-1 المأخوذة من الجرذان. وينتج عن هذا الدمج نوع من الخلايا يعبر بقوة عن مجموعة من الخصائص الشبيهة بالخلايا العصبية، مما يجعل NG108-15 نموذجًا مستخدمًا على نطاق واسع في الأبحاث العصبية البيولوجية والعصبية الدوائية. تُظهر الخلايا الهجينة درجة عالية من الاستثارة الكهربائية وتعبر عن إنزيمات عصبية مثل إنزيم أسيتيل ترانسفيراز الكولين، مما يتيح تخليق وتخزين وإطلاق الأسيتيل كولين. تشكل هذه الخلايا عمليات واسعة النطاق وهي قادرة على توليد إمكانات عمل استجابةً للتحفيز الكهربائي أو الكيميائي.

وقد ثبت أن خلايا NG108-15 تشكل مشابك كيميائية وظيفية مع الخلايا العضلية، بما في ذلك كل من الأنابيب العضلية الجنينية الأولية للفأر وخطوط الأنابيب العضلية المستنسخة مثل G-8. في أنظمة الزراعة المشتركة، يمكن لخلايا NG108-15 أن تعصب الأنابيب العضلية، مما ينتج عنه إمكانات مشبكية استجابةً لإمكانات العمل المستحثة. تعتمد هذه الاستجابات على الأسيتيل كولين ويمكن حجبها بواسطة d-tubocurarine، مما يؤكد الطبيعة الكولينية للمشابك العصبية. والجدير بالذكر أن كفاءة النقل المشبكي تختلف ولكنها تظل ذات أهمية من الناحية الفسيولوجية، حيث تنجح نسبة كبيرة من إمكانات العمل الهجينة في إحداث إزالة استقطاب العضلات. يتم محاكاة الاستجابات ما بعد المشبكية بشكل وثيق عن طريق التطبيق الأيوني للأسيتيل كولين، مما يدعم بشكل أكبر هويتها الكولينية.

خلايا NG108-15 هي خلايا كبيرة تشبه الخلايا العصبية ولها نتوءات وشكل يشبه ورم الخلايا العصبية. وهي تظهر سمات النمط النووي لكل من الفئران والجرذان، كما تظهر أنماطًا هجينة من الإيزوزيمات تتوافق مع خلفيتها الجينية المختلطة. تحافظ هذه الخلايا على الظواهر المظهرية الشبيهة بالخلايا العصبية حتى عند أعداد التمرير الأعلى، على الرغم من أن بعض الخصائص، مثل نشاط إنزيم أسيتيل ترانسفيراز الكولين، قد تنخفض بمرور الوقت. بشكل عام، تعتبر خلايا NG108-15 نموذجًا قويًا في المختبر لدراسة التمايز العصبي، والنقل العصبي، وتكوين المشابك العصبية، خاصة في سياق الإشارات التي يتوسطها الأسيتيل كولين.

الوسط: الوسط الأساسي لهذا الخط الخلوي هو وسط دولبيكو المعدل (DMEM) (رقم الكتالوج GIBCO/InVitrogen 12100-061، DMEM بدون بيروفات الصوديوم). لتحضير وسط النمو الكامل، أضف المكونات التالية إلى الوسط الأساسي:

• 0.1 مليمول/لتر من الهيبوكسانثين (التركيز النهائي)
• 400 نانومول أمينوبترين (التركيز النهائي)
• 0.016 مليمول/لتر ثيميدين (التركيز النهائي)
• 10% مصل جنيني بقري (التركيز النهائي)
• 1.5 غ/لتر من بيكربونات الصوديوم

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان