NG108-15

Dòng tế bào NG108-15 là một dòng tế bào lai giữa u thần kinh và u thần kinh đệm đã được đặc trưng rõ ràng, được tạo ra bằng cách hợp nhất dòng tế bào u thần kinh chuột N18TG2 với dòng tế bào u thần kinh đệm chuột cống C6-BU-1. Sự hợp nhất này tạo ra một loại tế bào biểu hiện mạnh mẽ một loạt các đặc tính giống tế bào thần kinh, khiến NG108-15 trở thành một mô hình được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu sinh học thần kinh và dược lý thần kinh. Các tế bào lai này thể hiện mức độ kích thích điện cao và biểu hiện các enzym thần kinh như choline acetyltransferase, cho phép tổng hợp, lưu trữ và giải phóng acetylcholine. Các tế bào này hình thành các quá trình rộng lớn và có khả năng tạo ra các tiềm năng hành động khi phản ứng với kích thích điện hoặc hóa học.

Các tế bào NG108-15 đã được chứng minh là hình thành các khớp thần kinh hóa học chức năng với các tế bào cơ, bao gồm cả các sợi cơ phôi chuột nguyên phát và các dòng sợi cơ vô tính như G-8. Trong các hệ thống nuôi cấy hỗn hợp, các tế bào NG108-15 có thể phân nhánh vào các sợi cơ, tạo ra các tiềm năng khớp thần kinh khi đáp ứng với các tiềm năng hành động được kích thích. Các phản ứng này phụ thuộc vào acetylcholine và có thể bị ức chế bởi d-tubocurarine, xác nhận bản chất cholinergic của các synapse. Đáng chú ý, hiệu suất truyền dẫn synapse thay đổi nhưng vẫn có ý nghĩa sinh lý, với một tỷ lệ đáng kể các tiềm năng hoạt động lai thành công gây ra sự depolarization cơ. Các phản ứng hậu synapse được mô phỏng chặt chẽ bằng cách ứng dụng acetylcholine qua iontophoretic, càng củng cố bản chất cholinergic của chúng.

Tế bào NG108-15 là các tế bào lớn, có hình thái giống neuron với các nhánh và hình thái tương tự u thần kinh. Chúng thể hiện cả các đặc điểm karyotype của chuột và chuột cống, và có các mẫu isozyme hỗn hợp phù hợp với nguồn gốc di truyền hỗn hợp của chúng. Các tế bào này duy trì các đặc điểm hình thái giống neuron ngay cả ở số lần nhân bản cao, mặc dù một số tính chất, như hoạt động của choline acetyltransferase, có thể giảm theo thời gian. Nhìn chung, các tế bào NG108-15 được coi là một mô hình in vitro đáng tin cậy để nghiên cứu sự biệt hóa thần kinh, truyền dẫn thần kinh và sự hình thành khớp thần kinh, đặc biệt là trong bối cảnh tín hiệu qua trung gian acetylcholine.

Môi trường nuôi cấy: Môi trường cơ bản cho dòng tế bào này là Môi trường Eagle sửa đổi của Dulbecco (GIBCO/InVitrogen, Mã sản phẩm 12100-061, DMEM không chứa natri pyruvate). Để chuẩn bị môi trường nuôi cấy hoàn chỉnh, hãy thêm các thành phần sau vào môi trường cơ bản:

• 0,1 mM hypoxanthine (nồng độ cuối cùng)
• 400 nM aminopterin (nồng độ cuối cùng)
• 0,016 mM thymidine (nồng độ cuối cùng)
• 10% huyết thanh bò thai (nồng độ cuối cùng)
• 1,5 g/L natri bicacbonat

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.