NG108-15

NG108-15-solulinja on hyvin karakterisoitu neuroblastooma-glioma-hybridisolulinja, joka on saatu fuusioimalla hiiren neuroblastoomaklooni N18TG2 rotan gliomakloonin C6-BU-1 kanssa. Tämän fuusion tuloksena syntyy solutyyppi, joka ilmentää voimakkaasti useita hermosolujen kaltaisia ominaisuuksia, minkä vuoksi NG108-15 on laajalti käytetty malli neurobiologisessa ja neurofarmakologisessa tutkimuksessa. Hybridisolut osoittavat korkeaa sähköistä herkkyyttä ja ilmentävät hermosoluentsyymejä, kuten koliiniasetyylitransferaasia, mikä mahdollistaa asetyylikoliinin synteesin, varastoinnin ja vapautumisen. Nämä solut muodostavat laajoja ulokkeita ja kykenevät tuottamaan aktiopotentiaaleja vasteena sähköiselle tai kemialliselle stimulaatiolle.

NG108-15-solujen on osoitettu muodostavan toiminnallisia kemiallisia synapseja lihassolujen kanssa, mukaan lukien sekä primaariset hiiren alkion myotubukset että kloonattuja myotubuslinjoja, kuten G-8. Yhteiskulttuurijärjestelmissä NG108-15-solut voivat hermottaa myotubuksia ja tuottaa synaptisia potentiaaleja vasteena herätetyille aktiopotentiaaleille. Nämä vasteet ovat riippuvaisia asetyylikoliinista ja ne voidaan estää d-tubokurariinilla, mikä vahvistaa synapsien kolinergisen luonteen. Huomionarvoista on, että synaptisen välityksen tehokkuus vaihtelee, mutta pysyy fysiologisesti merkittävänä, ja merkittävä osa hybriditoimintapotentiaaleista indusoi onnistuneesti lihasten depolarisaation. Postsynaptisia vasteita jäljitellään tarkasti asetyylikoliinin iontoforeettisella annostelulla, mikä tukee edelleen niiden kolinergistä identiteettiä.

NG108-15-solut ovat suuria, hermosolujen kaltaisia soluja, joilla on ulokkeita ja neuroblastooman kaltainen morfologia. Niillä on sekä hiiren että rotan karyotyyppisiä piirteitä, ja ne osoittavat hybridi-isoentsyymikuvioita, jotka ovat yhdenmukaisia niiden sekagenetiikan kanssa. Nämä solut säilyttävät hermosolujen kaltaiset fenotyypit jopa suuremmilla viljelykerroksilla, vaikka jotkin ominaisuudet, kuten koliiniasetyylitransferaasiaktiivisuus, voivat heikentyä ajan myötä. Kaiken kaikkiaan NG108-15-soluja pidetään vankkana in vitro -mallina hermosolujen erilaistumisen, hermovälityksen ja synaptogeneesin tutkimiseen, erityisesti asetyylikoliinin välittämän signalointijärjestelmän yhteydessä.

Elatusaine: Tämän solulinjan peruselatusaineena käytetään Dulbeccon muunnettua Eagle-elatusainetta (GIBCO/InVitrogen, tuotenro 12100-061, DMEM ilman natriumpyruvaattia). Valmistaaksesi täydellisen kasvatusliuoksen, lisää peruselatusaineeseen seuraavat aineosat:

• 0,1 mM hypoksantiinia (lopullinen pitoisuus)
• 400 nM aminopteriini (lopullinen pitoisuus)
• 0,016 mM tymidiiniä (lopullinen pitoisuus)
• 10 % sikiön naudan seerumia (lopullinen pitoisuus)
• 1,5 g/l natriumbikarbonaattia

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa