NG108-15

Garis sel NG108-15 adalah garis sel hibrida neuroblastoma × glioma yang telah teridentifikasi dengan baik, yang dihasilkan melalui fusi klon neuroblastoma tikus N18TG2 dengan klon glioma tikus C6-BU-1. Fusi ini menghasilkan jenis sel yang secara kuat mengekspresikan berbagai sifat mirip neuron, sehingga menjadikan NG108-15 sebagai model yang banyak digunakan dalam penelitian neurobiologi dan neurofarmakologi. Sel hibrida ini menunjukkan tingkat eksitabilitas listrik yang tinggi dan mengekspresikan enzim saraf seperti choline acetyltransferase, yang memungkinkan sintesis, penyimpanan, dan pelepasan asetilkolin. Sel-sel ini membentuk proses yang luas dan mampu menghasilkan potensial aksi sebagai respons terhadap stimulasi listrik atau kimia.

Sel NG108-15 telah terbukti membentuk sinaps kimia fungsional dengan sel otot, termasuk miotubus embrio tikus primer dan garis miotubus klonal seperti G-8. Dalam sistem kultur bersama, sel NG108-15 dapat menginervasi miotubus, menghasilkan potensial sinaptik sebagai respons terhadap potensial aksi yang diinduksi. Respons ini bergantung pada asetilkolin dan dapat dihambat oleh d-tubokurarin, yang mengonfirmasi sifat kolinergik sinaps tersebut. Perlu dicatat bahwa efisiensi transmisi sinaps bervariasi namun tetap bermakna secara fisiologis, dengan proporsi yang signifikan dari potensial aksi hibrida berhasil memicu depolarisasi otot. Respons pascasinaps ditiru secara dekat oleh aplikasi asetilkolin melalui iontoforesis, yang semakin mendukung identitas kolinergiknya.

Sel NG108-15 adalah sel besar yang menyerupai neuron, memiliki proses, dan morfologi mirip neuroblastoma. Sel ini menunjukkan karakteristik kariotipe tikus dan tikus, serta pola isoenzim hibrida yang konsisten dengan latar belakang genetik campurannya. Sel-sel ini mempertahankan fenotipe mirip neuron bahkan pada jumlah passage yang lebih tinggi, meskipun beberapa sifat, seperti aktivitas kolin asetiltransferase, mungkin menurun seiring waktu. Secara keseluruhan, sel NG108-15 dianggap sebagai model in vitro yang andal untuk mempelajari diferensiasi neuron, neurotransmisi, dan sinaptogenesis, terutama dalam konteks sinyalisasi yang dimediasi asetilkolin.

Media: Media dasar untuk garis sel ini adalah Dulbecco's Modified Eagle's Medium (GIBCO/InVitrogen No. Katalog 12100-061, DMEM tanpa natrium piruvat). Untuk membuat media pertumbuhan lengkap, tambahkan komponen-komponen berikut ke dalam media dasar:

• 0,1 mM hipoksantin (konsentrasi akhir)
• 400 nM aminopterin (konsentrasi akhir)
• 0,016 mM timidin (konsentrasi akhir)
• 10% serum sapi janin (konsentrasi akhir)
• 1,5 g/L natrium bikarbonat

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami