NG108-15

สายเซลล์ NG108-15 เป็นสายเซลล์ลูกผสมระหว่างเนื้องอกประสาท (neuroblastoma) × เนื้องอกในสมอง (glioma) ที่ได้รับการศึกษาอย่างละเอียด โดยได้มาจากการรวมเซลล์โคลน N18TG2 ของเนื้องอกประสาทในหนูกับเซลล์โคลน C6-BU-1 ของเนื้องอกในสมองในหนูแรท การรวมเซลล์นี้ส่งผลให้เกิดเซลล์ชนิดใหม่ที่แสดงลักษณะคล้ายเซลล์ประสาทอย่างชัดเจนในหลายด้าน ทำให้ NG108-15 เป็นแบบจำลองที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยด้านชีววิทยาประสาทและเภสัชวิทยาประสาท เซลล์ไฮบริดแสดงระดับความไวต่อการกระตุ้นทางไฟฟ้าสูงและแสดงเอนไซม์ของเซลล์ประสาท เช่น โคลีนอะซีติลทรานสเฟอเรส ซึ่งช่วยให้สามารถสังเคราะห์ เก็บรักษา และปล่อยอะเซทิลโคลีนได้ เซลล์เหล่านี้สร้างกระบวนการที่กว้างขวางและมีความสามารถในการสร้างศักย์ไฟฟ้าที่เกิดจากการกระตุ้นทางไฟฟ้าหรือเคมี

เซลล์ NG108-15 ได้แสดงให้เห็นว่าสามารถสร้างซินแนปส์เคมีที่ทำงานร่วมกับเซลล์กล้ามเนื้อได้ รวมถึงทั้งไมโอทูบของตัวอ่อนหนูชนิดปฐมภูมิและสายพันธุ์ไมโอทูบโคลนเช่น G-8 ในระบบเพาะเลี้ยงร่วม เซลล์ NG108-15 สามารถส่งสัญญาณไปยังไมโอทูบและสร้างศักย์ไฟฟ้าซินแนปส์ตอบสนองต่อศักย์ไฟฟ้าที่ถูกกระตุ้น การตอบสนองเหล่านี้ขึ้นอยู่กับอะเซทิลโคลีนและสามารถถูกยับยั้งโดย d-tubocurarine ซึ่งยืนยันลักษณะโคลิเนอร์จิกของไซแนปส์ ที่น่าสังเกตคือ ประสิทธิภาพของการส่งผ่านไซแนปส์มีความแปรปรวนแต่ยังคงมีความหมายทางสรีรวิทยา โดยมีสัดส่วนที่สำคัญของแอคชั่นพ็อเทนเชียลไฮบริดที่สามารถเหนี่ยวนำการดีโพลาไรเซชันของกล้ามเนื้อได้สำเร็จ การตอบสนองหลังไซแนปส์ถูกเลียนแบบอย่างใกล้ชิดโดยการประยุกต์ใช้ไอออนโตฟอเรซิสของอะเซทิลโคลีน ซึ่งสนับสนุนเพิ่มเติมถึงลักษณะโคลิเนอร์จิกของพวกมัน

เซลล์ NG108-15 เป็นเซลล์ขนาดใหญ่ มีลักษณะคล้ายเซลล์ประสาท มีกระบวนการและรูปร่างคล้ายเนื้องอกประสาทวิทยา (neuroblastoma) เซลล์เหล่านี้แสดงลักษณะทางโครโมโซมของทั้งหนูและหนูแรท และมีรูปแบบเอนไซม์ไอโซไซม์แบบลูกผสมซึ่งสอดคล้องกับพื้นหลังทางพันธุกรรมที่ผสมกัน เซลล์เหล่านี้ยังคงรักษาลักษณะทางฟีโนไทป์ของเซลล์ประสาทไว้ได้แม้จะผ่านจำนวนครั้งที่เพาะเลี้ยงสูงขึ้น แม้ว่าบางคุณสมบัติ เช่น กิจกรรมของเอนไซม์โคลีนอะซีติลทรานสเฟอเรส อาจลดลงเมื่อเวลาผ่านไป โดยรวมแล้ว เซลล์ NG108-15 ถือเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่มีความแข็งแกร่งสำหรับการศึกษาการแยกแยะของเซลล์ประสาท การส่งสัญญาณประสาท และการสร้างซินแนปส์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในบริบทของการส่งสัญญาณที่อาศัยอะเซทิลโคลีนเป็นตัวกลาง

ตัวกลาง: ตัวกลางพื้นฐานสำหรับเซลล์ไลน์นี้คือ Dulbecco's Modified Eagle's Medium (GIBCO/InVitrogen Catalog No. 12100-061, DMEM ไม่มีโซเดียมไพรูเวต) เพื่อทำตัวกลางสำหรับการเจริญเติบโตที่สมบูรณ์ ให้เติมส่วนประกอบต่อไปนี้ลงในตัวกลางพื้นฐาน:

• 0.1 มิลลิโมลาร์ ไฮโปแซนธีน (ความเข้มข้นสุดท้าย)
• 400 นาโนโมลาร์ อะมิโนพเทอริน (ความเข้มข้นสุดท้าย)
• 0.016 มิลลิโมลาร์ ไทมีดีน (ความเข้มข้นสุดท้าย)
• 10% เซรั่มจากตัวอ่อนวัว (ความเข้มข้นสุดท้าย)
• 1.5 กรัม/ลิตร โซเดียมไบคาร์บอเนต

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.