NG108-15

Bunka NG108-15 je dobre charakterizovaná hybridná bunka neuroblastómu a gliómu, ktorá vznikla fúziou klonu myšieho neuroblastómu N18TG2 s klonom potkanieho gliómu C6-BU-1. Výsledkom tejto fúzie je bunka, ktorá výrazne prejavuje celý rad neurónových vlastností, vďaka čomu je NG108-15 široko používaným modelom v neurobiologickom a neurofarmakologickom výskume. Hybridné bunky vykazujú vysoký stupeň elektrickej dráždivosti a exprimujú neurónové enzýmy, ako je cholínacetyltransferáza, čo umožňuje syntézu, ukladanie a uvoľňovanie acetylcholínu. Tieto bunky tvoria rozsiahle výbežky a sú schopné generovať akčné potenciály v reakcii na elektrickú alebo chemickú stimuláciu.

Ukázalo sa, že bunky NG108-15 tvoria funkčné chemické synapsie so svalovými bunkami, vrátane primárnych embryonálnych myotubov myší a klonálnych línií myotubov, ako je G-8. V systémoch spoločnej kultivácie môžu bunky NG108-15 inervovať myotuby a vytvárať synaptické potenciály v reakcii na vyvolané akčné potenciály. Tieto reakcie sú závislé od acetylcholínu a môžu byť blokované d-tubokurarinom, čo potvrdzuje cholinergickú povahu synáps. Je potrebné poznamenať, že účinnosť synaptického prenosu sa mení, ale zostáva fyziologicky významná, pričom významná časť hybridných akčných potenciálov úspešne indukuje depolarizáciu svalov. Postsynaptické reakcie sú veľmi podobné iontoforetickej aplikácii acetylcholínu, čo ďalej podporuje ich cholinergickú identitu.

Bunky NG108-15 sú veľké, neurónové bunky s výbežkami a morfológiou podobnou neuroblastómu. Vykazujú karyotypické znaky myší aj potkanov a vykazujú hybridné izoenzýmové vzory, ktoré sú v súlade s ich zmiešaným genetickým pozadím. Tieto bunky si zachovávajú neurónové fenotypy aj pri vyššom počte pasáží, hoci niektoré vlastnosti, ako je aktivita cholínacetyltransferázy, sa môžu časom znižovať. Celkovo sa bunky NG108-15 považujú za robustný in vitro model na štúdium neurónovej diferenciácie, neurotransmisie a synaptogenézy, najmä v kontexte signalizácie sprostredkovanej acetylcholínom.

Kultivačné médium: Základným médiom pre túto bunkovú líniu je Dulbeccovo modifikované Eagleovo médium (GIBCO/InVitrogen, katalógové č. 12100-061, DMEM bez pyruvátu sodného). Na prípravu kompletného rastového média pridajte do základného média nasledujúce zložky:

• 0,1 mM hypoxantín (konečná koncentrácia)
• 400 nM aminopterín (konečná koncentrácia)
• 0,016 mM tymidín (konečná koncentrácia)
• 10 % fetálneho bovinného séra (konečná koncentrácia)
• 1,5 g/l hydrogenuhličitanu sodného

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke