NG108-15

Клітинна лінія NG108-15 — це добре вивчена гібридна клітинна лінія нейробластоми та гліоми, отримана шляхом злиття клону мишачої нейробластоми N18TG2 з клоном щурячої гліоми C6-BU-1. У результаті цього злиття утворюється клітинний тип, який яскраво проявляє цілу низку нейроноподібних властивостей, що робить NG108-15 широко використовуваною моделлю для нейробіологічних та нейрофармакологічних досліджень. Гібридні клітини виявляють високий ступінь електричної збудливості та експресують нейрональні ферменти, такі як холін-ацетилтрансфераза, що забезпечує синтез, накопичення та вивільнення ацетилхоліну. Ці клітини утворюють розгалужені відростки та здатні генерувати потенціали дії у відповідь на електричну або хімічну стимуляцію.

Було показано, що клітини NG108-15 утворюють функціональні хімічні синапси з м’язовими клітинами, включаючи як первинні ембріональні міотуби мишей, так і клональні лінії міотуб, такі як G-8. У системах спільного культивування клітини NG108-15 можуть іннервувати міотуби, генеруючи синаптичні потенціали у відповідь на викликані потенціали дії. Ці реакції залежать від ацетилхоліну і можуть блокуватися d-тубокурарином, що підтверджує холінергічну природу синапсів. Примітно, що ефективність синаптичної передачі варіюється, але залишається фізіологічно значущою, причому значна частка гібридних потенціалів дії успішно індукує деполяризацію м’язів. Постсинаптичні реакції тісно імітуються іонофоретичним введенням ацетилхоліну, що додатково підтверджує їхню холінергічну природу.

Клітини NG108-15 — це великі, подібні до нейронів клітини з відростками та морфологією, схожою на нейробластому. Вони виявляють як каріотипні ознаки мишей, так і щурів, а також демонструють гібридні патерни ізоферментів, що відповідає їхньому змішаному генетичному походженню. Ці клітини зберігають нейроноподібні фенотипи навіть при більшій кількості пасажів, хоча деякі властивості, такі як активність холін-ацетилтрансферази, можуть з часом знижуватися. Загалом клітини NG108-15 вважаються надійною in vitro моделлю для вивчення нейрональної диференціації, нейротрансмісії та синаптогенезу, особливо в контексті ацетилхоліноопосередкованої сигналізації.

Середовище: Базовим середовищем для цієї клітинної лінії є модифіковане середовище Дульбекко-Ігл (GIBCO/InVitrogen, № каталогу 12100-061, DMEM без пірувату натрію). Для приготування повного середовища для культивування додайте до базового середовища такі компоненти:

• 0,1 мМ гіпоксантину (кінцева концентрація)
• 400 нМ аміноптерину (кінцева концентрація)
• 0,016 мМ тимідину (кінцева концентрація)
• 10 % ембріональної сироватки бика (кінцева концентрація)
• 1,5 г/л бікарбонату натрію

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>