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MDCK (NBL-2)
Tissue
肾脏
Synonyms
MDCK, NBL-2, Madin-Darby Canine Kidney, Madin Darby Canine Kidney

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MDCK (NBL-2)

Cell line · Product number 602280

MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cells serve as a pivotal vitro model in pharmaceutical sciences, particularly in the study of epithelial transport, epith...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

MDCK(Madin-Darby 犬肾)细胞是制药科学中一个重要的体外模型,特别是在研究上皮转运、上皮渗透性以及作为膜渗透性评估工具方面。这些细胞最初来源于犬的肾小管细胞,具有类似肠细胞的特性,因此是极佳的吸收筛选模型,也是评估药物转运机制的可靠细胞系。

MDCK 细胞用于探索分支形态发生,这是了解器官发育和细胞分化的关键过程。这种复杂的组织能力强调了它们在研究上皮组织结构和细胞积累方面的相关性。

MDCK 细胞能形成紧密的极化上皮层,是研究上皮屏障功能和细胞极性的宝贵模型,也是药物载体系统和研究固有膜渗透性不可或缺的模型。MDCK 细胞单层中存在顶端膜和明确的细胞连接,这有助于进行详细的渗透性实验,从而加深我们对上皮细胞经皮层分泌以及固有的转运和代谢功能的了解。

在病毒学领域,MDCK 细胞是研究人类流感病毒(如 H3N2 株)的关键,因为它们表达与这些病毒兼容的受体。这使它们成为研究病毒感染的复杂性、检查上皮细胞如何应对病毒挑战的关键资源。它们的用途还扩展到评估抗病毒药物和疫苗,这进一步强调了它们在传染病研究和治疗开发中的重要性。

总之,MDCK 细胞因其上皮特性、转运研究以及在病毒感染模型(尤其是流感病毒)中的实用性,在制药和病毒学研究中具有不可估量的价值,使它们成为我们了解药物输送、上皮生物学和传染病的不可或缺的工具。

Tissue
肾脏
Synonyms
  • MDCK
  • NBL-2
  • Madin-Darby Canine Kidney
  • Madin Darby Canine Kidney

02Classification

Organism
Dog
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮样
Cell type
上皮细胞

04Identifiers

Citation
MDCK(NBL-2)(Cytion 目录号 602280)
NCBI TaxID
9615
Cellosaurus
CVCL_0422

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
水泡性口炎(印第安纳)、疫苗、柯萨奇病毒 B5、雷诺病毒 2、3、腺病毒 4、5、猪水泡性红斑、传染性犬肝炎
Virus resistance
脊髓灰质炎病毒 2、柯萨奇病毒 B3、B4
Reverse transcriptase
阴性
Products
角蛋白

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中添加 10% FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
Seeding density
1 × 10⁴ 个细胞/平方厘米
Fluid renewal
每 3 天
Post-thaw recovery
解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

08Donor

Breed / subspecies
可卡犬
Donor age
成人