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MDCK (NBL-2)
Tissue
Riñón
Synonyms
MDCK, NBL-2, Madin-Darby Canine Kidney, Madin Darby Canine Kidney

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MDCK (NBL-2)

Cell line · Product number 602280

MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cells serve as a pivotal vitro model in pharmaceutical sciences, particularly in the study of epithelial transport, epith...

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01General information

Description

Las células MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) constituyen un modelo in vitro fundamental en las ciencias farmacéuticas, especialmente en el estudio del transporte epitelial y la permeabilidad epitelial, así como una herramienta para evaluar la permeabilidad de las membranas. Estas células, derivadas originalmente de células de los túbulos renales de un perro, presentan propiedades similares a las de los enterocitos, lo que las convierte en un excelente modelo de cribado de absorción y en una línea celular confiable para evaluar los mecanismos de transporte de fármacos.

Las células MDCK se utilizan para investigar la morfogénesis ramificada, un proceso crucial para comprender el desarrollo de los órganos y la diferenciación celular. Esta capacidad de organización compleja subraya su relevancia en el estudio de la arquitectura del tejido epitelial y la acumulación celular.

Las células MDCK son muy apreciadas por su capacidad para formar capas epiteliales compactas y polarizadas, lo que las convierte en un modelo valioso para estudiar la función de barrera epitelial y la polaridad celular, y las hace un modelo indispensable para los sistemas de transporte de fármacos y el estudio de la permeabilidad intrínseca de la membrana. La presencia de membranas apicales y uniones celulares bien definidas en las monocapas de células MDCK facilita la realización de experimentos detallados de permeabilidad, lo que mejora nuestra comprensión de la secreción transepitelial y de las funciones de transporte y metabólicas inherentes a las células epiteliales.

En virología, las células MDCK son fundamentales para estudiar los virus de la influenza humana, como la cepa H3N2, ya que expresan receptores compatibles con esos virus. Esto las convierte en un recurso clave para investigar las complejidades de las infecciones virales, al permitir examinar cómo reaccionan las células epiteliales ante los desafíos virales. Su utilidad se extiende a la evaluación de agentes antivirales y vacunas, lo que resalta aún más su importancia en la investigación de enfermedades infecciosas y el desarrollo terapéutico.

En resumen, las células MDCK son de un valor incalculable en la investigación farmacéutica y virológica por sus características epiteliales, los estudios de transporte y su utilidad en modelos de infección viral, particularmente para los virus de la influenza, lo que las hace indispensables para avanzar en nuestra comprensión de la administración de fármacos, la biología epitelial y las enfermedades infecciosas.

Tissue
Riñón
Synonyms
  • MDCK
  • NBL-2
  • Madin-Darby Canine Kidney
  • Madin Darby Canine Kidney

02Classification

Organism
Dog
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Cell type
Epithelial

04Identifiers

Citation
MDCK (NBL-2) (número de catálogo de Cytion 602280)
NCBI TaxID
9615
Cellosaurus
CVCL_0422

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
Estomatitis vesicular (Indiana), vacuna, virus Coxsackie B5, reovirus 2 y 3, adenovirus 4 y 5, exantema vesicular porcino, hepatitis infecciosa canina
Virus resistance
Poliovirus 2, virus Coxsackie B3 y B4
Reverse transcriptase
Negativo
Products
Queratina

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:F12 de Ham (1:1), p/v: 3,1 g/L de glucosa, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p: 0,5 mM de piruvato de sodio, p: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añade al medio un 10 % de FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Seeding density
1 x 10⁴ células/cm²
Fluid renewal
Cada 3 días
Post-thaw recovery
Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Breed / subspecies
Cocker Spaniel
Donor age
Adulto