Skip to content
MDCK (NBL-2)
Tissue
Thận
Synonyms
MDCK, NBL-2, Madin-Darby Canine Kidney, Madin Darby Canine Kidney

Documents

MDCK (NBL-2)

Cell line · Product number 602280

MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cells serve as a pivotal vitro model in pharmaceutical sciences, particularly in the study of epithelial transport, epith...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Tế bào MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) đóng vai trò là mô hình in vitro quan trọng trong khoa học dược phẩm, đặc biệt trong nghiên cứu vận chuyển biểu mô, độ thấm biểu mô và là công cụ đánh giá độ thấm màng. Các tế bào này, ban đầu được phân lập từ tế bào ống thận của chó, có đặc tính tương tự như tế bào ruột, khiến chúng trở thành mô hình sàng lọc hấp thu tuyệt vời và dòng tế bào đáng tin cậy để đánh giá cơ chế vận chuyển thuốc.

Tế bào MDCK được sử dụng để nghiên cứu quá trình phân nhánh morphogenesis, một quá trình quan trọng để hiểu sự phát triển của cơ quan và sự biệt hóa tế bào. Khả năng tổ chức phức tạp này nhấn mạnh tầm quan trọng của chúng trong việc nghiên cứu cấu trúc mô biểu mô và tích tụ tế bào.

Tế bào MDCK được đánh giá cao vì khả năng hình thành các lớp biểu mô chặt chẽ, phân cực, khiến chúng trở thành mô hình quý giá để nghiên cứu chức năng hàng rào biểu mô và phân cực tế bào, đồng thời là mô hình không thể thiếu cho các hệ thống vận chuyển thuốc và nghiên cứu tính thấm màng nội tại. Sự hiện diện của màng apical và các điểm nối tế bào được định nghĩa rõ ràng trong lớp đơn tế bào MDCK cho phép thực hiện các thí nghiệm thấm chi tiết, nâng cao hiểu biết về tiết qua biểu mô và các chức năng vận chuyển và chuyển hóa vốn có của tế bào biểu mô.

Trong virology, tế bào MDCK đóng vai trò quan trọng trong việc nghiên cứu virus cúm ở người, như chủng H3N2, vì chúng biểu hiện các thụ thể tương thích với các virus này. Điều này khiến chúng trở thành nguồn tài nguyên quan trọng để nghiên cứu các cơ chế phức tạp của nhiễm trùng virus, xem xét cách tế bào biểu mô phản ứng với các thách thức virus. Tính hữu dụng của chúng còn mở rộng đến việc đánh giá các tác nhân chống virus và vắc-xin, nhấn mạnh thêm tầm quan trọng của chúng trong nghiên cứu bệnh truyền nhiễm và phát triển điều trị.

Tóm lại, tế bào MDCK là vô giá trong nghiên cứu dược phẩm và vi rút học nhờ các đặc tính biểu mô, nghiên cứu vận chuyển và ứng dụng trong mô hình nhiễm trùng vi rút, đặc biệt là vi rút cúm, khiến chúng trở thành công cụ không thể thiếu trong việc nâng cao hiểu biết về vận chuyển thuốc, sinh học biểu mô và bệnh truyền nhiễm.

Tissue
Thận
Synonyms
  • MDCK
  • NBL-2
  • Madin-Darby Canine Kidney
  • Madin Darby Canine Kidney

02Classification

Organism
Dog
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Cell type
Thượng bì

04Identifiers

Citation
MDCK (NBL-2) (Số catalog Cytion 602280)
NCBI TaxID
9615
Cellosaurus
CVCL_0422

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
Viêm miệng mụn nước (Indiana), virus vaccinia, virus coxsackie B5, virus reo 2, 3, virus adenovirus 4, 5, phát ban mụn nước ở lợn, viêm gan truyền nhiễm ở chó
Virus resistance
Vi-rút polio type 2, vi-rút coxsackie type B3, B4
Reverse transcriptase
Tiêu cực
Products
Keratin

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
Mỗi 3 ngày
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
Chó Cocker Spaniel
Donor age
Người lớn