Pāriet uz saturu
MDCK (NBL-2)
Audums
Nieres
Sinonīmi
MDCK, NBL-2, Madin-Darby Canine Kidney, Madin Darby Canine Kidney

Dokumenti

MDCK (NBL-2)

Cell line · Preces numurs 602280

MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cells serve as a pivotal vitro model in pharmaceutical sciences, particularly in the study of epithelial transport, epith...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) šūnas kalpo kā galvenais vitro modelis farmācijas zinātnēs, jo īpaši epitēlija transporta, epitēlija caurlaidības un membrānu caurlaidības novērtēšanas pētījumos. Šīm šūnām, kas sākotnēji iegūtas no suņu nieru kanāliņu šūnām, piemīt īpašības, kas līdzīgas enterocītiem, padarot tās par lielisku absorbcijas skrīninga modeli un uzticamu šūnu līniju zāļu transporta mehānismu novērtēšanai.

MDCK šūnas tiek izmantotas, lai pētītu sazarojumu morfogēzi, kas ir būtisks process, lai izprastu orgānu attīstību un šūnu diferenciāciju. Šī sarežģītās organizācijas spēja uzsver to nozīmi epitēlija audu arhitektūras un šūnu uzkrāšanās pētniecībā.

MDCK šūnas ir labi zināmas ar savu spēju veidot ciešus, polarizētus epitēlija slāņus, padarot tās par vērtīgu modeli epitēlija barjeras funkcijas un šūnu polaritātes pētīšanai, padarot tās par neaizstājamu modeli zāļu nesēju sistēmām un iekšējās membrānu caurlaidības pētījumiem. Apikālo membrānu un labi definētu šūnu savienojumu klātbūtne MDCK šūnu monoslāņos atvieglo detalizētus caurlaidības eksperimentus, uzlabojot mūsu izpratni par transepiteļa sekrēciju un epitēlija šūnām raksturīgajām transporta un vielmaiņas funkcijām.

Viroloģijā MDCK šūnas ir ļoti svarīgas cilvēka gripas vīrusu, piemēram, H3N2 celma, izpētei, jo tās ekspresē ar šiem vīrusiem saderīgus receptorus. Tas padara tās par galveno resursu, lai pētītu vīrusu infekciju nianses, pārbaudot, kā epitēlija šūnas reaģē uz vīrusu izraisītajām problēmām. To lietderība paplašinās, lai novērtētu pretvīrusu līdzekļus un vakcīnas, vēl vairāk uzsverot to nozīmi infekcijas slimību pētniecībā un terapeitisko līdzekļu izstrādē.

Kopumā MDCK šūnas ir nenovērtējamas farmācijas un virusoloģiskajos pētījumos, jo tām piemīt epitēlija īpašības, transporta pētījumi un tās ir noderīgas vīrusu infekcijas modeļos, jo īpaši attiecībā uz gripas vīrusiem, padarot tās neaizstājamas, lai uzlabotu mūsu izpratni par zāļu piegādi, epitēlija bioloģiju un infekcijas slimībām.

Audums
Nieres
Sinonīmi
  • MDCK
  • NBL-2
  • Madin-Darby Canine Kidney
  • Madin Darby Canine Kidney

02Klasifikācija

Organisms
Suns
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
MDCK (NBL-2) (Cytion kataloga numurs 602280)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9615
Cellosaurus
CVCL_0422

05Pazīmes un uzņēmība

Jutība pret vīrusiem
Vezikulārais stomatīts (Indiana), vakcīnija, koksackie vīruss B5, reovīruss 2, 3, adenovīruss 4, 5, cūku vezikulārā eksantēma, suņu infekciozais hepatīts
Izturība pret vīrusiem
Poliovīruss 2, koksackie vīruss B3, B4
Reversā transkriptāze
Negatīvs
Produkti
Keratīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 3 dienām
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Kokerspaniels
Donora vecums
Pieaugušo