Przejdź do treści
MDCK (NBL-2)
Chusteczka
Nerka
Synonimy
MDCK, NBL-2, Madin-Darby Canine Kidney, Madin Darby Canine Kidney

Dokumenty

MDCK (NBL-2)

Cell line · Numer produktu 602280

MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cells serve as a pivotal vitro model in pharmaceutical sciences, particularly in the study of epithelial transport, epith...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) służą jako kluczowy model in vitro w naukach farmaceutycznych, szczególnie w badaniach transportu nabłonkowego, przepuszczalności nabłonka oraz jako narzędzie do oceny przepuszczalności błon. Komórki te, pierwotnie pochodzące z komórek kanalików nerkowych psów, wykazują właściwości podobne do enterocytów, co czyni je doskonałym modelem do badań przesiewowych absorpcji i niezawodną linią komórkową do oceny mechanizmów transportu leków.

Komórki MDCK są wykorzystywane do badania morfogenezy rozgałęzień, procesu kluczowego dla zrozumienia rozwoju narządów i różnicowania komórkowego. Ta zdolność do złożonej organizacji podkreśla ich znaczenie w badaniu architektury tkanki nabłonkowej i akumulacji komórek.

Komórki MDCK są dobrze znane ze swojej zdolności do tworzenia szczelnych, spolaryzowanych warstw nabłonkowych, co czyni je cennym modelem do badania funkcji bariery nabłonkowej i polaryzacji komórek, co czyni je niezbędnym modelem dla systemów nośników leków i badania wewnętrznej przepuszczalności błon. Obecność błon wierzchołkowych i dobrze zdefiniowanych połączeń komórkowych w monowarstwach komórek MDCK ułatwia szczegółowe eksperymenty przepuszczalności, zwiększając nasze zrozumienie wydzielania przez nabłonek oraz funkcji transportowych i metabolicznych właściwych komórkom nabłonkowym.

W wirusologii komórki MDCK odgrywają kluczową rolę w badaniu ludzkich wirusów grypy, takich jak szczep H3N2, ponieważ wyrażają receptory kompatybilne z tymi wirusami. To sprawia, że są one kluczowym zasobem do badania zawiłości infekcji wirusowych, badając, jak komórki nabłonkowe reagują na wyzwania wirusowe. Ich użyteczność rozciąga się na ocenę środków przeciwwirusowych i szczepionek, co dodatkowo podkreśla ich znaczenie w badaniach nad chorobami zakaźnymi i rozwoju terapeutycznym.

Podsumowując, komórki MDCK są nieocenione w badaniach farmaceutycznych i wirusologicznych ze względu na ich właściwości nabłonkowe, badania transportu i użyteczność w modelach infekcji wirusowych, szczególnie w przypadku wirusów grypy, co czyni je niezbędnymi w pogłębianiu naszej wiedzy na temat dostarczania leków, biologii nabłonka i chorób zakaźnych.

Chusteczka
Nerka
Synonimy
  • MDCK
  • NBL-2
  • Madin-Darby Canine Kidney
  • Madin Darby Canine Kidney

02Klasyfikacja

Organizm
Pies
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Typ komórki
Nabłonek

04Identyfikatory

Źródło
MDCK (NBL-2) (numer katalogowy Cytion 602280)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9615
Cellosaurus
CVCL_0422

05Ekspresja i podatność

Podatność na wirusy
Pęcherzykowe zapalenie jamy ustnej (Indiana), krowianka, coxsackievirus B5, reowirus 2, 3, adenowirus 4, 5, pęcherzykowa wysypka świń, zakaźne zapalenie wątroby psów
Odporność na wirusy
Poliowirus 2, wirus Coxsackie B3, B4
Transkryptaza odwrotna
Negatywny
Produkty
Keratyna

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
Co 3 dni
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
Cocker Spaniel
Wiek dawcy
Dorosły