Skip to content
MDCK (NBL-2)
Tissue
ไต
Synonyms
MDCK, NBL-2, Madin-Darby Canine Kidney, Madin Darby Canine Kidney

Documents

MDCK (NBL-2)

Cell line · Product number 602280

MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cells serve as a pivotal vitro model in pharmaceutical sciences, particularly in the study of epithelial transport, epith...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่สำคัญในวิทยาศาสตร์เภสัชกรรม โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาการขนส่งของเยื่อบุผิว การซึมผ่านของเยื่อบุผิว และเป็นเครื่องมือในการประเมินการซึมผ่านของเยื่อหุ้ม เซลล์เหล่านี้ซึ่งมีต้นกำเนิดจากเซลล์ท่อไตของสุนัข มีคุณสมบัติคล้ายกับเซลล์เยื่อบุลำไส้ ทำให้เป็นแบบจำลองการคัดกรองการดูดซึมที่ยอดเยี่ยมและเป็นสายพันธุ์เซลล์ที่เชื่อถือได้สำหรับการประเมินกลไกการขนส่งของยา

เซลล์ MDCK ถูกนำมาใช้ในการศึกษาการเกิดรูปร่างแบบแตกแขนง ซึ่งเป็นกระบวนการสำคัญต่อการทำความเข้าใจการพัฒนาอวัยวะและการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ ความสามารถในการจัดระเบียบที่ซับซ้อนนี้เน้นย้ำถึงความสำคัญในการศึกษาโครงสร้างของเนื้อเยื่อเยื่อบุผิวและการสะสมของเซลล์

เซลล์ MDCK ได้รับการยอมรับอย่างสูงในด้านความสามารถในการสร้างชั้นเยื่อบุผิวที่แน่นหนาและมีขั้ว ทำให้เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาการทำงานของเยื่อบุผิวและขั้วของเซลล์ ทำให้เป็นแบบจำลองที่ขาดไม่ได้สำหรับระบบขนส่งยาและการศึกษาการซึมผ่านของเยื่อหุ้มเซลล์โดยธรรมชาติการมีเยื่อหุ้มเซลล์ส่วนยอดและรอยต่อเซลล์ที่ชัดเจนในชั้นเซลล์เดี่ยวของเซลล์ MDCK ช่วยอำนวยความสะดวกในการทดลองการซึมผ่านในระดับละเอียด ซึ่งช่วยเพิ่มความเข้าใจของเราเกี่ยวกับการหลั่งผ่านเยื่อบุผิวและการขนส่งและหน้าที่เมตาบอลิซึมที่มีอยู่ในเซลล์เยื่อบุผิว

ในวิทยาไวรัส เซลล์ MDCK มีความสำคัญอย่างยิ่งในการศึกษาไวรัสไข้หวัดใหญ่ในมนุษย์ เช่น สายพันธุ์ H3N2 เนื่องจากเซลล์เหล่านี้สามารถแสดงตัวรับที่เข้ากันได้กับไวรัสเหล่านี้ได้ ซึ่งทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นทรัพยากรสำคัญในการศึกษาความซับซ้อนของการติดเชื้อไวรัส ตรวจสอบวิธีที่เซลล์เยื่อบุผิวตอบสนองต่อการท้าทายของไวรัส ความสามารถในการใช้งานของเซลล์เหล่านี้ยังครอบคลุมไปถึงการประเมินประสิทธิภาพของสารต้านไวรัสและวัคซีน ซึ่งยิ่งเน้นย้ำถึงความสำคัญของพวกมันในการวิจัยโรคติดเชื้อและการพัฒนาการรักษา

โดยสรุป เซลล์ MDCK มีคุณค่าอย่างยิ่งในการวิจัยทางเภสัชกรรมและไวรัสวิทยา เนื่องจากลักษณะเฉพาะของเซลล์เยื่อบุผิว การศึกษาการขนส่ง และประโยชน์ในการสร้างแบบจำลองการติดเชื้อไวรัส โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับไวรัสไข้หวัดใหญ่ ทำให้เซลล์เหล่านี้มีความจำเป็นอย่างยิ่งในการพัฒนาความเข้าใจของเราเกี่ยวกับการนำส่งยา ชีววิทยาของเซลล์เยื่อบุผิว และโรคติดเชื้อ

Tissue
ไต
Synonyms
  • MDCK
  • NBL-2
  • Madin-Darby Canine Kidney
  • Madin Darby Canine Kidney

02Classification

Organism
Dog
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Cell type
เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
MDCK (NBL-2) (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 602280)
NCBI TaxID
9615
Cellosaurus
CVCL_0422

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
โรคปากและเท้าเปื่อย (อินเดียนา), ไวรัสวัคซีเนีย, ไวรัสคอกซากีบี 5, รีโอไวรัส 2, 3, อะดีโนไวรัส 4, 5, โรคผื่นตุ่มน้ำในสุกร, โรคตับอักเสบติดต่อในสุนัข
Virus resistance
โปลิโอไวรัส 2, คอกซากีไวรัส B3, B4
Reverse transcriptase
เชิงลบ
Products
เคราติน

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
ทุก 3 วัน
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
ค็อกเกอร์ สแปเนียล
Donor age
ผู้ใหญ่