الانتقال إلى المحتوى
MDCK (NBL-2)
الأنسجة
الكلى
المرادفات
MDCK, NBL-2, Madin-Darby Canine Kidney, Madin Darby Canine Kidney

المستندات

MDCK (NBL-2)

Cell line · رقم المنتج 602280

MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cells serve as a pivotal vitro model in pharmaceutical sciences, particularly in the study of epithelial transport, epith...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تُستخدم خلايا MDCK (خلايا كلى مادن داربي كانين) كنموذج مختبري محوري في العلوم الصيدلانية، خاصةً في دراسة النقل الظهاري والنفاذية الظهارية وكأداة لتقييم نفاذية الأغشية. تُظهر هذه الخلايا، المشتقة في الأصل من خلايا الأنابيب الكلوية للكلاب، خصائص مشابهة للخلايا المعوية، مما يجعلها نموذجًا ممتازًا لفحص الامتصاص وخطًا خلويًا موثوقًا لتقييم آليات نقل الأدوية.

تُستخدم خلايا MDCK لاستكشاف التشكل المتفرّع، وهي عملية حاسمة لفهم تطور الأعضاء والتمايز الخلوي. وتؤكد هذه القدرة على التنظيم المعقد على أهميتها في دراسة بنية الأنسجة الظهارية والتراكم الخلوي.

تشتهر خلايا MDCK بقدرتها على تشكيل طبقات طلائية مستقطبة ومحكمة، مما يجعلها نموذجاً قيماً لدراسة وظيفة الحاجز الظهاري واستقطاب الخلايا، مما يجعلها نموذجاً لا غنى عنه لأنظمة حاملات الأدوية ودراسة نفاذية الأغشية الداخلية. إن وجود أغشية قميّة وتقاطعات خلوية واضحة المعالم في الطبقات الأحادية لخلايا MDCK يسهّل إجراء تجارب نفاذية مفصّلة، مما يعزز فهمنا للإفراز عبر الظهارة ووظائف النقل والتمثيل الغذائي المتأصلة في الخلايا الظهارية.

في علم الفيروسات، تُعد خلايا MDCK محورية لدراسة فيروسات الإنفلونزا البشرية، مثل سلالة H3N2، لأنها تعبر عن مستقبلات متوافقة مع تلك الفيروسات. وهذا ما يجعلها موردًا رئيسيًا لدراسة تعقيدات العدوى الفيروسية، وفحص كيفية تفاعل الخلايا الظهارية مع التحديات الفيروسية. وتمتد فائدتها لتشمل تقييم العوامل واللقاحات المضادة للفيروسات، مما يؤكد أهميتها في أبحاث الأمراض المعدية والتطوير العلاجي.

باختصار، تُعد خلايا MDCK لا تقدر بثمن في الأبحاث الصيدلانية والفيروسية لخصائصها الظهارية ودراسات النقل وفائدتها في نماذج العدوى الفيروسية، خاصةً فيروسات الإنفلونزا، مما يجعلها لا غنى عنها في تطوير فهمنا لتوصيل الأدوية وبيولوجيا الظهارة والأمراض المعدية.

الأنسجة
الكلى
المرادفات
  • MDCK
  • NBL-2
  • Madin-Darby Canine Kidney
  • Madin Darby Canine Kidney

02التصنيف

كائن حي
كلب
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
نوع الخلية
الظهارة

04المعرّفات

المرجع
MDCK (NBL-2) (كتالوج سيتيون رقم 602280)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9615
سيلوصور
CVCL_0422

05التعبير والقابلية للإصابة

قابلية الإصابة بالفيروس
التهاب الفم الحويصلي (إنديانا)، والتهاب الفم الحويصلي (إنديانا)، واللقاحات، وفيروس كوكساكي B5، وفيروسات الريبوفيروس 2، 3، والفيروس الغدي 4، 5، والطفح الحويصلي للخنازير، والتهاب الكبد الكلبي المعدي
مقاومة الفيروسات
فيروس شلل الأطفال 2، فيروس شلل الأطفال B3، B4
إنزيم النسخ العكسي
سلبي
المنتجات
الكيراتين

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
كل 3 أيام
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
كلب ذليل الديك الرومي
عمر المتبرع
للبالغين