Gå til innholdet
MDCK (NBL-2)
Vev
Nyre
Synonymer
MDCK, NBL-2, Madin-Darby Canine Kidney, Madin Darby Canine Kidney

Dokumenter

MDCK (NBL-2)

Cell line · Produktnummer 602280

MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cells serve as a pivotal vitro model in pharmaceutical sciences, particularly in the study of epithelial transport, epith...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

MDCK-celler (Madin-Darby Canine Kidney) er en sentral vitro-modell i farmasøytisk forskning, særlig når det gjelder studier av epiteltransport, epitelpermeabilitet og som et verktøy for evaluering av membranpermeabilitet. Disse cellene, som opprinnelig stammer fra nyretubulusceller fra hund, har egenskaper som ligner på enterocytter, noe som gjør dem til en utmerket modell for absorpsjonsscreening og en pålitelig cellelinje for evaluering av transportmekanismer for legemidler.

MDCK-celler brukes til å utforske forgreningsmorfogenese, en prosess som er avgjørende for å forstå organutvikling og celledifferensiering. Denne evnen til kompleks organisering understreker deres relevans når det gjelder å studere epitelvevsarkitektur og celleakkumulering.

MDCK-celler er velkjente for sin evne til å danne tette, polariserte epitellag, noe som gjør dem til en verdifull modell for studier av epitelbarrierefunksjon og cellepolaritet, og dermed en uunnværlig modell for medikamentbærende systemer og studier av iboende membranpermeabilitet. Tilstedeværelsen av apikale membraner og veldefinerte celleoverganger i MDCK-cellemonolag muliggjør detaljerte permeabilitetseksperimenter, noe som øker vår forståelse av transepitelial sekresjon og epitelcellenes iboende transport- og metabolske funksjoner.

Innen virologi er MDCK-celler sentrale for studier av humane influensavirus, for eksempel H3N2-stammen, fordi de uttrykker reseptorer som er kompatible med disse virusene. Dette gjør dem til en nøkkelressurs når man skal undersøke hvordan epitelceller reagerer på virusinfeksjoner, og hvordan de reagerer på virale utfordringer. De kan også brukes til å evaluere antivirale midler og vaksiner, noe som ytterligere understreker deres betydning for forskning på infeksjonssykdommer og utvikling av behandlingsmetoder.

MDCK-celler er uvurderlige i farmasøytisk og virologisk forskning på grunn av deres epitelegenskaper, transportstudier og nytteverdi i virusinfeksjonsmodeller, spesielt for influensavirus, noe som gjør dem uunnværlige for å øke vår forståelse av legemiddeladministrasjon, epitelbiologi og infeksjonssykdommer.

Vev
Nyre
Synonymer
  • MDCK
  • NBL-2
  • Madin-Darby Canine Kidney
  • Madin Darby Canine Kidney

02Klassifisering

Organisme
Hund
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MDCK (NBL-2) (Cytion-katalognummer 602280)
NCBI-skattenummer
9615
Cellosaurus
CVCL_0422

05Uttrykk og mottakelighet

Virusfølsomhet
Vesikulær stomatitt (Indiana), vaksinose, coxsackievirus B5, reovirus 2, 3, adenovirus 4, 5, vesikulært eksantem hos svin, infeksiøs hepatitt hos hund
Virusresistens
Poliovirus 2, coxsackievirus B3, B4
Revers transkriptase
Negativ
Produkter
Keratin

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
Hver tredje dag
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
Cocker Spaniel
Donorens alder
Voksen