Gå direkte til indholdet
MDCK (NBL-2)
Væv
Nyre
Synonymer
MDCK, NBL-2, Madin-Darby Canine Kidney, Madin Darby Canine Kidney

Dokumenter

MDCK (NBL-2)

Cell line · Varenummer 602280

MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cells serve as a pivotal vitro model in pharmaceutical sciences, particularly in the study of epithelial transport, epith...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

MDCK-celler (Madin-Darby Canine Kidney) fungerer som en central vitro-model inden for farmaceutisk videnskab, især i studiet af epitheltransport, epithelpermeabilitet og som et værktøj til evaluering af membranpermeabilitet. Disse celler, der oprindeligt stammer fra nyretubulusceller fra en hund, har egenskaber, der minder om enterocytter, hvilket gør dem til en fremragende absorptions-screeningsmodel og en pålidelig cellelinje til evaluering af lægemiddeltransportmekanismer.

MDCK-celler bruges til at udforske forgreningsmorfogenese, en proces, der er afgørende for at forstå organudvikling og celledifferentiering. Denne evne til kompleks organisering understreger deres relevans i studiet af epitelvævets arkitektur og celleakkumulering.

MDCK-celler er velansete for deres evne til at danne tætte, polariserede epitellag, hvilket gør dem til en værdifuld model til undersøgelse af epitelbarrierefunktion og cellepolaritet, hvilket gør dem til en uundværlig model for lægemiddelbærersystemer og undersøgelse af intrinsisk membranpermeabilitet. Tilstedeværelsen af apikale membraner og veldefinerede celleovergange i MDCK-cellemonolag letter detaljerede permeabilitetsforsøg og øger vores forståelse af transepitelial sekretion og de transport- og metaboliske funktioner, der er forbundet med epitelceller.

Inden for virologi er MDCK-celler afgørende for studier af humane influenzavira, som f.eks. H3N2-stammen, fordi de udtrykker receptorer, der er kompatible med disse vira. Det gør dem til en nøgleressource til at undersøge de indviklede aspekter af virusinfektioner og undersøge, hvordan epitelceller reagerer på virale udfordringer. Deres anvendelighed strækker sig til at evaluere antivirale midler og vacciner, hvilket yderligere understreger deres betydning i forskning i infektionssygdomme og terapeutisk udvikling.

Kort sagt er MDCK-celler uvurderlige i farmaceutisk og virologisk forskning på grund af deres epitelegenskaber, transportundersøgelser og anvendelighed i virusinfektionsmodeller, især for influenzavirus, hvilket gør dem uundværlige til at fremme vores forståelse af lægemiddelafgivelse, epitelbiologi og infektionssygdomme.

Væv
Nyre
Synonymer
  • MDCK
  • NBL-2
  • Madin-Darby Canine Kidney
  • Madin Darby Canine Kidney

02Klassificering

Organisme
Hund
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MDCK (NBL-2) (Cytion katalognummer 602280)
NCBI-skattenummer
9615
Cellosaurus
CVCL_0422

05Udtryk og modtagelighed

Virusfølsomhed
Vesikulær stomatitis (Indiana), vaccinia, coxsackievirus B5, reovirus 2, 3, adenovirus 4, 5, vesikulært exanthem hos svin, infektiøs hepatitis hos hunde
Virusresistens
Poliovirus 2, coxsackievirus B3, B4
Revers transkriptase
Negativ
Produkter
Keratin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
Hver 3. dag
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
Cocker Spaniel
Donorens alder
Voksen