Премини към съдържанието
MDCK (NBL-2)
Тъкан
Бъбреци
Синоними
MDCK, NBL-2, Madin-Darby Canine Kidney, Madin Darby Canine Kidney

Документи

MDCK (NBL-2)

Cell line · Номер на продукта 602280

MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cells serve as a pivotal vitro model in pharmaceutical sciences, particularly in the study of epithelial transport, epith...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетките MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) служат като основен ин витро модел във фармацевтичните науки, особено при изучаването на епителния транспорт, епителната пропускливост и като инструмент за оценка на мембранната пропускливост. Тези клетки, първоначално получени от бъбречни тубулни клетки на куче, проявяват свойства, близки до ентероцитите, което ги прави отличен модел за скрининг на абсорбцията и надеждна клетъчна линия за оценка на механизмите на лекарствения транспорт.

MDCK клетките се използват за изследване на морфогенезата на разклоненията - процес, който е от решаващо значение за разбирането на развитието на органите и клетъчната диференциация. Тази способност за сложна организация подчертава значението им за изучаване на архитектурата на епителната тъкан и клетъчното натрупване.

MDCK клетките са добре познати заради способността си да образуват плътни, поляризирани епителни слоеве, което ги прави ценен модел за изучаване на епителната бариерна функция и клетъчната полярност, превръщайки ги в незаменим модел за системи за пренасяне на лекарства и изучаване на вътрешната мембранна пропускливост. Наличието на апикални мембрани и добре дефинирани клетъчни връзки в монослойните MDCK клетки улеснява подробните експерименти за пропускливост, като подобрява разбирането ни за трансепителната секреция и транспортните и метаболитните функции, присъщи на епителните клетки.

В областта на вирусологията MDCK клетките са от основно значение за изследване на човешки грипни вируси, като щама H3N2, тъй като те експресират рецептори, съвместими с тези вируси. Това ги прави ключов ресурс за изследване на тънкостите на вирусните инфекции, като се проучва как епителните клетки реагират на вирусните предизвикателства. Тяхната полезност се разпростира върху оценката на антивирусни агенти и ваксини, което допълнително подчертава значението им в изследванията на инфекциозните заболявания и разработването на терапии.

В обобщение, MDCK клетките са безценни във фармацевтичните и вирусологичните изследвания заради техните епителни характеристики, изследвания на транспорта и полезност в моделите на вирусни инфекции, особено за грипните вируси, което ги прави незаменими за напредъка в разбирането ни за доставката на лекарства, епителната биология и инфекциозните заболявания.

Тъкан
Бъбреци
Синоними
  • MDCK
  • NBL-2
  • Madin-Darby Canine Kidney
  • Madin Darby Canine Kidney

02Класификация

Организъм
Куче
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителиален

04Идентификатори

Източник
MDCK (NBL-2) (каталожен номер 602280 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9615
Целозавър
CVCL_0422

05Проява и предразположеност

Податливост към вируси
Везикуларен стоматит (Индиана), ваксина, коксакивирус В5, реовирус 2, 3, аденовирус 4, 5, везикуларна екзантема при свинете, инфекциозен кучешки хепатит
Устойчивост към вируси
Полиовирус 2, коксакивирус В3, В4
Обратна транскриптаза
Отрицателен
Продукти
Кератин

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
На всеки 3 дни
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
Кокер шпаньол
Възраст на донора
Възрастни