Перейти до вмісту
MDCK (NBL-2)
Тканина
Нирка
Синоніми
MDCK, NBL-2, Madin-Darby Canine Kidney, Madin Darby Canine Kidney

Документи

MDCK (NBL-2)

Cell line · Номер товару 602280

MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cells serve as a pivotal vitro model in pharmaceutical sciences, particularly in the study of epithelial transport, epith...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітини MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) слугують ключовою моделлю in vitro у фармацевтичних науках, зокрема, у вивченні епітеліального транспорту, епітеліальної проникності та як інструмент для оцінки проникності мембран. Ці клітини, отримані з клітин ниркових канальців собаки, мають властивості, подібні до ентероцитів, що робить їх чудовою моделлю для скринінгу абсорбції та надійною клітинною лінією для оцінки механізмів транспорту лікарських засобів.

Клітини MDCK використовуються для вивчення морфогенезу розгалужень - процесу, що має вирішальне значення для розуміння розвитку органів і клітинної диференціації. Ця здатність до складної організації підкреслює їх актуальність у вивченні архітектури епітеліальної тканини та клітинної акумуляції.

Клітини MDCK добре відомі своєю здатністю утворювати щільні, поляризовані епітеліальні шари, що робить їх цінною моделлю для вивчення епітеліальної бар'єрної функції та клітинної полярності, що робить їх незамінною моделлю для систем переносу ліків та вивчення внутрішньої проникності мембран. Наявність апікальних мембран і чітко визначених клітинних з'єднань у моношарах клітин MDCK полегшує проведення детальних експериментів з вивчення проникності, поглиблюючи наше розуміння трансепітеліальної секреції, а також транспортних і метаболічних функцій, притаманних епітеліальним клітинам.

У вірусології клітини MDCK відіграють ключову роль у вивченні вірусів грипу людини, таких як штам H3N2, оскільки вони експресують рецептори, сумісні з цими вірусами. Це робить їх ключовим ресурсом для дослідження тонкощів вірусних інфекцій, вивчення того, як епітеліальні клітини реагують на вірусні виклики. Їх корисність поширюється на оцінку противірусних препаратів і вакцин, що ще більше підкреслює їх значення в дослідженнях інфекційних захворювань і терапевтичних розробках.

Таким чином, клітини MDCK є безцінними у фармацевтичних та вірусологічних дослідженнях завдяки своїм епітеліальним характеристикам, транспортним дослідженням та корисності в моделях вірусних інфекцій, зокрема вірусів грипу, що робить їх незамінними для поглиблення нашого розуміння доставки ліків, біології епітелію та інфекційних захворювань.

Тканина
Нирка
Синоніми
  • MDCK
  • NBL-2
  • Madin-Darby Canine Kidney
  • Madin Darby Canine Kidney

02Класифікація

Організм
Собака
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Тип клітини
Епітеліальний

04Ідентифікатори

Посилання
MDCK (NBL-2) (номер за каталогом Cytion 602280)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9615
Целозавр
CVCL_0422

05Експресія та сприйнятливість

Вразливість до вірусів
Везикулярний стоматит (Індіана), вакцинація, вірус Коксакі В5, реовірус 2, 3, аденовірус 4, 5, везикулярна екзантема свиней, інфекційний гепатит собак
Стійкість до вірусів
Поліовірус 2, вірус Коксакі B3, B4
Зворотна транскриптаза
Негативно
Продукція
Кератин

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 г/л Глюкоза, w: 2,5 мМ L-глутамін, w: 15 мМ HEPES, w: 0,5 мМ Піруват натрію, w: 1,2 г/л NaHCO3 (цит. номер 820400a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
1 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
Кожні 3 дні
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
Кокер-спанієль
Вік донора
Дорослий