.jpg)
- Kude
- Neerud
- Sünonüümid
- MDCK, NBL-2, Madin-Darby Canine Kidney, Madin Darby Canine Kidney
Dokumendid
MDCK (NBL-2)
Cell line · Toote number 602280
MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cells serve as a pivotal vitro model in pharmaceutical sciences, particularly in the study of epithelial transport, epith...
Kohandamine / Soovitused
- MDCK (NBL-2)Cell line€430.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) rakud on farmaatsiateadustes oluline vitro mudel, eriti epiteeli transpordi ja epiteeli läbilaskvuse uurimisel ning membraani läbilaskvuse hindamise vahendina. Need rakud, mis on algselt saadud koera neeru tubulirakkudest, omavad enterotsüütidega sarnaseid omadusi, mis teeb neist suurepärase imendumise sõeluuringu mudeli ja usaldusväärse rakuliini ravimite transpordimehhanismide hindamiseks.
MDCK rakke kasutatakse hargnemismorfogeneesi uurimiseks, mis on elundite arengu ja rakkude diferentseerumise mõistmiseks ülioluline protsess. See võime kompleksseks organiseerumiseks rõhutab nende tähtsust epiteelkoe arhitektuuri ja rakkude akumulatsiooni uurimisel.
MDCK rakud on tuntud oma võime poolest moodustada tihedaid, polariseeritud epiteelikihte, mis muudab nad väärtuslikuks mudeliks epiteeli barjääri funktsiooni ja rakkude polaarsuse uurimiseks, mistõttu on nad asendamatu mudel ravimikandjate süsteemide ja membraani sisemise läbilaskvuse uurimiseks. Apikaalsete membraanide ja hästi määratletud rakuliidete olemasolu MDCK rakkude monokihis hõlbustab üksikasjalikke läbilaskvuse katseid, parandades meie arusaamist transepiteliaalsest sekretsioonist ning epiteelirakkudele omastest transpordi- ja ainevahetusfunktsioonidest.
Viroloogias on MDCK-rakud olulised inimese gripiviiruste, näiteks H3N2-tüve uurimiseks, sest nad ekspresseerivad nende viirustega ühilduvaid retseptoreid. Seetõttu on nad peamine ressurss viirusinfektsioonide keerukuse uurimiseks, uurides, kuidas epiteelirakud reageerivad viiruslikele väljakutsetele. Nende kasulikkus laieneb ka viirusevastaste ainete ja vaktsiinide hindamisele, mis rõhutab veelgi nende tähtsust nakkushaiguste uurimisel ja ravimiarenduses.
Kokkuvõttes on MDCK rakud hindamatu väärtusega farmaatsia- ja viroloogilistes uuringutes nende epiteeli omaduste, transpordiuuringute ja kasulikkuse tõttu viirusinfektsiooni mudelites, eriti gripiviiruste puhul, mis muudab nad asendamatuks meie arusaamade edendamisel ravimite manustamisest, epiteelibioloogiast ja nakkushaigustest.
- Kude
- Neerud
- Sünonüümid
- MDCK
- NBL-2
- Madin-Darby Canine Kidney
- Madin Darby Canine Kidney
02Klassifikatsioon
- Organism
- Koer
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Epiteelilaadsed
- Rakutüüp
- Epiteel
04Tunnused
- Viide
- MDCK (NBL-2) (Cytioni katalooginumber 602280)
- NCBI maksukood
- 9615
- Cellosaurus
- CVCL_0422
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Viirusele vastuvõtlikkus
- Vesikulaarne stomatiit (Indiana), vaktsiinia, koksackiiviirus B5, reoviirus 2, 3, adenoviirus 4, 5, sigade vesikulaarne eksanteem, koerte nakkuslik hepatiit
- Viirusresistentsus
- Polioviirus 2, koksackieviirus B3, B4
- Pöördtranskriptaas
- Negatiivne
- Tooted
- Keratiin
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Külvitihedus
- 1 x 104 rakku/cm2
- Vedeliku vahetus
- Iga 3 päeva tagant
- Taastumine pärast sulamist
- Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Tõug / alamliik
- Cocker-spanjel
- Doonori vanus
- Täiskasvanud
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Vastutuse välistamine
- Meie rakud on ette nähtud üksnes in vitro laboratoorseks uurimistööks ning need ei ole mõeldud kliiniliseks või diagnostiliseks kasutamiseks, samuti ei tohi neid manustada inimestele ega kasutada veterinaarsetel eesmärkidel. Kasutajad peavad järgima kõiki kohaldatavaid suuniseid ja eeskirju nende rakkude käitlemise ja kasutamise kohta teadusuuringutes.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah