Siirry sisältöön
MDCK (NBL-2)
Kudos
Munuaiset
Synonyymit
MDCK, NBL-2, Madin-Darby Canine Kidney, Madin Darby Canine Kidney

Asiakirjat

MDCK (NBL-2)

Cell line · Tuotenumero 602280

MDCK (Madin-Darby Canine Kidney) cells serve as a pivotal vitro model in pharmaceutical sciences, particularly in the study of epithelial transport, epith...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MDCK-solut (Madin-Darby Canine Kidney) ovat keskeinen vitro-malli farmaseuttisissa tieteissä, erityisesti epiteelin kuljetuksen ja epiteelin läpäisevyyden tutkimuksessa sekä kalvon läpäisevyyden arvioinnin välineenä. Näillä soluilla, jotka on alun perin johdettu koiran munuaistubulussoluista, on enterosyyttien kaltaisia ominaisuuksia, mikä tekee niistä erinomaisen imeytymisen seulontamallin ja luotettavan solulinjan lääkeaineiden kuljetusmekanismien arviointiin.

MDCK-soluja käytetään haarautumismorfogeneesin tutkimiseen, joka on elinten kehityksen ja solujen erilaistumisen ymmärtämisen kannalta ratkaiseva prosessi. Tämä kyky monimutkaiseen organisoitumiseen korostaa niiden merkitystä epiteelikudoksen arkkitehtuurin ja solujen kertymisen tutkimisessa.

MDCK-soluja arvostetaan niiden kyvystä muodostaa tiiviitä, polarisoituneita epiteelikerroksia, mikä tekee niistä arvokkaan mallin epiteelin esteen toiminnan ja solujen polariteetin tutkimiseen, mikä tekee niistä välttämättömän mallin lääkekuljetusjärjestelmille ja kalvon sisäisen läpäisevyyden tutkimiseen. Apikaalisten kalvojen ja hyvin määriteltyjen soluliitosten läsnäolo MDCK-solukerroksissa helpottaa yksityiskohtaisia läpäisevyyskokeita, mikä lisää ymmärrystämme transsepiteliaalisesta erittymisestä sekä epiteelisoluille ominaisista kuljetus- ja aineenvaihduntatoiminnoista.

Virologian alalla MDCK-solut ovat keskeisiä ihmisen influenssavirusten, kuten H3N2-kannan, tutkimisessa, koska ne ilmentävät näiden virusten kanssa yhteensopivia reseptoreita. Tämän vuoksi ne ovat keskeinen resurssi virusinfektioiden monimutkaisuuden tutkimisessa ja sen selvittämisessä, miten epiteelisolut reagoivat viruksen aiheuttamiin haasteisiin. Niiden hyödyllisyys ulottuu myös viruslääkkeiden ja rokotteiden arviointiin, mikä korostaa entisestään niiden merkitystä tartuntatautien tutkimuksessa ja terapeuttisessa kehittämisessä.

Yhteenvetona voidaan todeta, että MDCK-solut ovat korvaamattomia lääke- ja virologisessa tutkimuksessa niiden epiteeliominaisuuksien, kuljetustutkimusten ja virustartuntamallien, erityisesti influenssavirusten, hyödyllisyyden vuoksi, mikä tekee niistä korvaamattomia lääkkeiden annostelun, epiteelin biologian ja tartuntatautien ymmärtämisen edistämisessä.

Kudos
Munuaiset
Synonyymit
  • MDCK
  • NBL-2
  • Madin-Darby Canine Kidney
  • Madin Darby Canine Kidney

02Luokittelu

Organismi
Koira
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
MDCK (NBL-2) (Cytionin luettelonumero 602280)
NCBI-verotunnus
9615
Cellosaurus
CVCL_0422

05Ilmentyminen ja alttius

Viruksille altistuminen
Vesikulaarinen stomatiitti (Indiana), rokote, coxsackievirus B5, reovirus 2, 3, adenovirus 4, 5, sikojen vesikulaarinen eksanteema, tarttuva koirahepatiitti
Virusten kestävyys
Poliovirus 2, coxsackievirus B3, B4
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen
Tuotteet
Keratiini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
3 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Cockerspanieli
Luovuttajan ikä
Aikuiset