الانتقال إلى المحتوى
3T3-Swiss Albino
الأنسجة
جنيني
المرادفات
3T3 Swiss Albino, 3T3, Swiss-3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

المستندات

3T3-Swiss Albino

Cell line · رقم المنتج 400103

The 3T3-Swiss Albino cell line is a fibroblast cell line derived from the tissues of a Swiss albino mouse embryo. Developed in the 1960s by George Todaro ...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

سلسلة الخلايا 3T3-Swiss Albino هي سلسلة خلايا ليفية مشتقة من أنسجة جنين فأر ألبينو سويسري. طورها جورج تودارو وهوارد جرين في ستينيات القرن الماضي، وكانت هذه السلسلة من أوائل السلاسل التي أنشئت لغرض الزراعة طويلة الأمد والبحث في الخلايا الليفية. يشير الاسم "3T3" إلى البروتوكول المستخدم في زراعة هذه الخلايا: "3" أيام فاصل زمني و"T3" لكثافة السكان التي زرعت فيها الخلايا (3 × 105 خلية لكل قارورة 20 سم²).

تُستخدم خلايا 3T3-Swiss Albino عادةً كنظام نموذجي لدراسة بيولوجيا الخلايا الليفية، بما في ذلك الشيخوخة الخلوية والتحول وتأثيرات مختلف الأدوية والسموم على صحة الخلايا وتكاثرها. وتشتهر هذه الخلايا بشكل خاص بمتانتها وموثوقيتها في دعم تكاثر فيروسات الثدييات المختلفة وإنتاج اللقاحات الفيروسية. بالإضافة إلى ذلك، تلعب هذه الخلايا دورًا أساسيًا في أبحاث السرطان، حيث توفر نموذجًا متسقًا لفحص الآليات الخلوية لتكوين الأورام وتفاعل الخلايا السرطانية مع بيئات النسيج الضام.

من الناحية الجينية، تتميز خلايا 3T3-Swiss Albino بنمط كروموسومي مستقر، مما يسهل استخدامها في الدراسات الجينية. وهي قابلة للتكيف بدرجة عالية مع مختلف الظروف المختبرية، مما يجعلها ذات قيمة كبيرة للدراسات الجينية والخلوية والكيميائية الحيوية. لا يمكن المبالغة في دورها في تطوير البحوث الطبية الحيوية، حيث توفر رؤى مهمة حول العمليات الخلوية والأهداف العلاجية المحتملة في مختلف الأمراض.

الأنسجة
جنيني
التطبيقات
وقد استخدمت هذه الخلايا لدراسة تطور السرطان وتقدمه، وتطور الأجنة وتمايزها، ومسارات الإشارات المشاركة في العمليات الخلوية مثل نمو الخلايا وتمايزها، وكركيزة لإنتاج الأجسام المضادة أحادية النسيلة والتعبير عن البروتينات المؤتلفة لإنتاجها وتنقيتها.
المرادفات
  • 3T3 Swiss Albino
  • 3T3
  • Swiss-3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
أرومة ليفية شبيهة بالأرومة الليفية
نوع الخلية
الأرومة الليفية
مُسبِّب للأورام
لا يوجد
حالة البلويدية
فرط الصبغيات
النمط الكروموسومي
2n=40
زمن المضاعفة
18 ساعة

04المعرّفات

المرجع
3T3-Swiss Albino (رقم الكتالوج Cytion 400103)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_0120

05التعبير والقابلية للإصابة

الفيروسات
تم اختباره وتبين أنه سلبي لفيروس إكتروميليا (جدري الفئران).
قابلية الإصابة بالفيروس
فيروس متعدد الفيروس، SV40
إنزيم النسخ العكسي
سلبي
المنتجات
T

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
0,5 إلى 3 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 48 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
المهق السويسري
عمر المتبرع
الجنين