Siirry sisältöön
3T3-Swiss Albino
Kudos
Alkioaikainen
Synonyymit
3T3 Swiss Albino, 3T3, Swiss-3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

Asiakirjat

3T3-Swiss Albino

Cell line · Tuotenumero 400103

The 3T3-Swiss Albino cell line is a fibroblast cell line derived from the tissues of a Swiss albino mouse embryo. Developed in the 1960s by George Todaro ...

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

3T3-Swiss Albino -solulinja on fibroblastisolulinja, joka on peräisin sveitsiläisen albiinomysien alkion kudoksista. George Todaro ja Howard Green kehittivät tämän linjan 1960-luvulla, ja se oli yksi ensimmäisistä linjoista, jotka perustettiin fibroblastisolujen pitkäaikaista viljelyä ja tutkimusta varten. Nimi "3T3" viittaa näiden solujen aliviljelyyn käytettyyn protokollaan: "3" tarkoittaa 3 päivän väliä ja "T3" solujen siemenviljelytiheyttä (3 x 105 solua 20 cm²:n pullossa).

3T3-Swiss Albino -soluja käytetään yleisesti mallijärjestelmänä fibroblastien biologian tutkimuksessa, mukaan lukien solujen ikääntyminen, transformaatio ja erilaisten lääkkeiden ja toksiinien vaikutukset solujen terveyteen ja replikaatioon. Ne ovat erityisen tunnettuja kestävyydestään ja luotettavuudestaan tukea erilaisten nisäkkäiden virusten replikaatiota ja tuottaa virusrokotteita. Lisäksi nämä solut ovat tärkeitä syöpätutkimuksessa, sillä ne tarjoavat yhdenmukaisen mallin syövän syntymekanismien ja syöpäsolujen vuorovaikutuksen sidekudosympäristön kanssa tutkimiseen.

Geneettisesti 3T3-Swiss Albino -solut ovat tunnettuja vakaasta karyotyypistään, mikä helpottaa niiden käyttöä geneettisissä tutkimuksissa. Ne sopeutuvat hyvin erilaisiin in vitro -olosuhteisiin, mikä tekee niistä erittäin arvokkaita geneettisissä, sytologisissa ja biokemiallisissa tutkimuksissa. Niiden roolia biolääketieteellisen tutkimuksen kehityksessä ei voi yliarvioida, sillä ne tarjoavat tärkeää tietoa soluprosesseista ja mahdollisista terapeuttisista kohteista erilaisissa sairauksissa.

Kudos
Alkioaikainen
Sovellukset
Näitä soluja on käytetty syövän kehittymisen ja etenemisen, alkion kehityksen ja erilaistumisen, solujen kasvun ja erilaistumisen kaltaisiin soluprosesseihin liittyvien signalointireittien tutkimiseen sekä monoklonaalisten vasta-aineiden tuotannon ja rekombinanttiproteiinien ilmentymisen substraattina tuotantoa ja puhdistusta varten.
Synonyymit
  • 3T3 Swiss Albino
  • 3T3
  • Swiss-3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset
Solutyyppi
Fibroblastit
Kasvaimia aiheuttava
Ei
Ploidisuus
Hypertriploidinen
Karyotyyppi
2n=40
Kaksinkertaistumisaika
18 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
3T3-Swiss Albino (Cytion-tuotenumero 400103)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_0120

05Ilmentyminen ja alttius

Virukset
Testattu ja todettu negatiiviseksi ektromelia-virukselle (hiirirokko).
Viruksille altistuminen
Polyomavirus, SV40
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen
Tuotteet
T

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
0,5–3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua jäädyttämisprosessista ja kiinnittyä vähintään 48 tunnin ajan.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Sveitsin albiino
Luovuttajan ikä
Alkio