Pāriet uz saturu
3T3-Swiss Albino
Audums
Embrionālais
Sinonīmi
3T3 Swiss Albino, 3T3, Swiss-3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

Dokumenti

3T3-Swiss Albino

Cell line · Preces numurs 400103

The 3T3-Swiss Albino cell line is a fibroblast cell line derived from the tissues of a Swiss albino mouse embryo. Developed in the 1960s by George Todaro ...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

3T3-Swiss Albino šūnu līnija ir fibroblastu šūnu līnija, kas iegūta no Šveices albīno peles embrija audiem. Šo līniju 1960. gados izstrādāja Džordžs Todaro un Hovards Grīns, un tā bija viena no pirmajām, kas tika izveidota fibroblastu šūnu ilgtermiņa kultivēšanai un pētīšanai. Nosaukums "3T3" attiecas uz protokolu, kas tiek izmantots šo šūnu subkultivēšanai: "3" dienas intervāls un "T3" populācijas blīvums, ar kādu šūnas tiek sētas (3 x 105 šūnas uz 20 cm² kolbu).

3T3-Swiss Albino šūnas parasti izmanto kā modelis sistēmu fibroblastu bioloģijas pētīšanai, tostarp šūnu novecošanai, transformācijai un dažādu farmaceitisko vielu un toksīnu ietekmei uz šūnu veselību un replikāciju. Tās ir īpaši pazīstamas ar savu izturību un uzticamību, atbalstot dažādu zīdītāju vīrusu replikāciju un ražojot vīrusu vakcīnas. Turklāt šīs šūnas ir nozīmīgas vēža pētniecībā, nodrošinot konsekventu modeli onkogēzes šūnu mehānismu un vēža šūnu mijiedarbības ar saistaudu vidi izpētei.

Ģenētiski 3T3-Swiss Albino šūnas raksturo stabils kariotips, kas atvieglo to izmantošanu ģenētiskajos pētījumos. Tās ir ļoti pielāgojamas dažādiem in vitro apstākļiem, padarot tās ārkārtīgi vērtīgas ģenētiskajos, citoloģiskajos un bioķīmiskajos pētījumos. To nozīme biomedicīnisko pētījumu attīstībā ir nenovērtējama, sniedzot būtiskas atziņas par šūnu procesiem un potenciālajiem terapeitiskajiem mērķiem dažādās slimībās.

Audums
Embrionālais
Pieteikumi
Šīs šūnas ir izmantotas, lai pētītu vēža attīstību un progresēšanu, embriju attīstību un diferenciāciju, signālu pārraides ceļus, kas iesaistīti šūnu procesos, piemēram, šūnu augšanā un diferenciācijā, kā arī kā substrāts monoklonālo antivielu ražošanai un rekombinantās proteīnu ekspresijai ražošanai un attīrīšanai.
Sinonīmi
  • 3T3 Swiss Albino
  • 3T3
  • Swiss-3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Fibroblasti
Tumorogēns
Nē
Ploidijas statuss
Hipertriploīds
Kariotips
2n=40
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
18 stundas

04Identifikatori

Atsauce
3T3-Swiss Albino (Cytion kataloga numurs 400103)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0120

05Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Pārbaudīts un atzīts par negatīvu attiecībā uz ektromelijas vīrusu (peles vējbakas).
Jutība pret vīrusiem
Poliomavīruss, SV40
Reversā transkriptāze
Negatīvs
Produkti
T

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
0,5 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Šveices albīns
Donora vecums
Embrijs