Przejdź do treści
3T3-Swiss Albino
Chusteczka
Embrionalny
Synonimy
3T3 Swiss Albino, 3T3, Swiss-3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

Dokumenty

3T3-Swiss Albino

Cell line · Numer produktu 400103

The 3T3-Swiss Albino cell line is a fibroblast cell line derived from the tissues of a Swiss albino mouse embryo. Developed in the 1960s by George Todaro ...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa 3T3-Swiss Albino to linia komórek fibroblastów pochodzących z tkanek embrionów myszy Swiss Albino. Opracowana w latach 60. XX wieku przez George'a Todaro i Howarda Greena, była jedną z pierwszych linii stworzonych z myślą o długoterminowej hodowli i badaniach komórek fibroblastów. Nazwa „3T3” odnosi się do protokołu stosowanego do subkultury tych komórek: „3” oznacza trzydniowy odstęp, a „T3” gęstość populacji, przy której komórki były wysiewane (3 x 105 komórek na kolbę o powierzchni 20 cm²).

Komórki 3T3-Swiss Albino są powszechnie stosowane jako modelowy system do badania biologii fibroblastów, w tym starzenia się komórek, transformacji oraz wpływu różnych leków i toksyn na zdrowie i replikację komórek. Są one szczególnie znane ze swojej wytrzymałości i niezawodności we wspieraniu replikacji różnych wirusów ssaków oraz w produkcji szczepionek wirusowych. Ponadto komórki te odgrywają kluczową rolę w badaniach nad rakiem, stanowiąc spójny model do badania mechanizmów komórkowych onkogenezy oraz interakcji komórek nowotworowych ze środowiskiem tkanki łącznej.

Pod względem genetycznym komórki 3T3-Swiss Albino charakteryzują się stabilnym kariotypem, co ułatwia ich wykorzystanie w badaniach genetycznych. Są one wysoce przystosowalne do różnych warunków in vitro, co czyni je niezwykle cennymi w badaniach genetycznych, cytologicznych i biochemicznych. Nie można przecenić ich roli w rozwoju badań biomedycznych, ponieważ dostarczają one kluczowych informacji na temat procesów komórkowych i potencjalnych celów terapeutycznych w różnych chorobach.

Chusteczka
Embrionalny
Zastosowania
Komórki te były wykorzystywane do badania rozwoju i progresji nowotworów, rozwoju i różnicowania embrionalnego, szlaków sygnałowych zaangażowanych w procesy komórkowe, takie jak wzrost i różnicowanie komórek, a także jako substrat do produkcji przeciwciał monoklonalnych i ekspresji rekombinowanych białek do produkcji i oczyszczania.
Synonimy
  • 3T3 Swiss Albino
  • 3T3
  • Swiss-3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do fibroblastów
Typ komórki
Fibroblast
Nowotworotwórczy
Nie
Status ploidii
Hipertriploid
Karyotyp
2n=40
Czas podwojenia
18 godzin

04Identyfikatory

Źródło
3T3-Swiss Albino (numer katalogowy Cytion 400103)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0120

05Ekspresja i podatność

Wirusy
Wynik testu na obecność wirusa ektromelii (mysiej ospy) był ujemny.
Podatność na wirusy
Poliomawirus, SV40
Transkryptaza odwrotna
Negatywny
Produkty
T

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
0,5 do 3 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 48 godzin, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
Szwajcarski albinos
Wiek dawcy
Zarodek