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3T3-Swiss Albino
Gewebe
Embryonal
Synonyme
3T3 Swiss Albino, 3T3, Swiss-3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

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3T3-Swiss Albino

Cell line · Artikelnummer 400103

The 3T3-Swiss Albino cell line is a fibroblast cell line derived from the tissues of a Swiss albino mouse embryo. Developed in the 1960s by George Todaro ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die 3T3-Swiss-Albino-Zelllinie ist eine Fibroblasten-Zelllinie, die aus dem Gewebe eines Swiss-Albino-Mausembryos gewonnen wurde. Diese Zelllinie wurde in den 1960er Jahren von George Todaro und Howard Green entwickelt und war eine der ersten, die für die Langzeitkultivierung und Erforschung von Fibroblasten-Zellen etabliert wurde. Der Name „3T3” bezieht sich auf das Protokoll, das für die Subkultivierung dieser Zellen verwendet wird: „3” steht für das Intervall von drei Tagen und „T3” für die Populationsdichte, bei der die Zellen ausgesät wurden (3 x 105 Zellen pro 20 cm² Flasche).

3T3-Swiss-Albino-Zellen werden häufig als Modellsystem für die Untersuchung der Fibroblastenbiologie verwendet, einschließlich der Zellalterung, Transformation und der Auswirkungen verschiedener Arzneimittel und Toxine auf die Zellgesundheit und -replikation. Sie sind besonders bekannt für ihre Robustheit und Zuverlässigkeit bei der Unterstützung der Replikation verschiedener Säugetierviren und für die Herstellung von viralen Impfstoffen. Darüber hinaus spielen diese Zellen eine wichtige Rolle in der Krebsforschung, da sie ein konsistentes Modell für die Untersuchung der zellulären Mechanismen der Onkogenese und der Interaktion von Krebszellen mit der Bindegewebsumgebung bieten.

Genetisch zeichnen sich 3T3-Swiss-Albino-Zellen durch einen stabilen Karyotyp aus, was ihre Verwendung in genetischen Studien erleichtert. Sie sind sehr anpassungsfähig an verschiedene In-vitro-Bedingungen, was sie für genetische, zytologische und biochemische Studien äußerst wertvoll macht. Ihre Rolle in der Entwicklung der biomedizinischen Forschung kann nicht hoch genug eingeschätzt werden, da sie wichtige Einblicke in zelluläre Prozesse und potenzielle therapeutische Ziele bei verschiedenen Krankheiten liefern.

Gewebe
Embryonal
Anwendungen
Diese Zellen wurden zur Untersuchung der Krebsentwicklung und -progression, der Embryonalentwicklung und -differenzierung, der Signalwege, die an zellulären Prozessen wie Zellwachstum und -differenzierung beteiligt sind, sowie als Substrat für die Herstellung monoklonaler Antikörper und die Expression rekombinanter Proteine zur Herstellung und Reinigung verwendet.
Synonyme
  • 3T3 Swiss Albino
  • 3T3
  • Swiss-3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblastenähnlich
Zelltyp
Fibroblasten
Tumorauslösend
Nein
Ploidie-Status
Hypertriploid
Karyotyp
2n=40
Verdopplungszeit
18 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
3T3-Swiss Albino (Cytion Katalognummer 400103)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_0120

05Expression und Anfälligkeit

Viren
Getestet und für negativ befunden auf Ektromelie-Virus (Mauspocken).
Anfälligkeit für Viren
Polyomavirus, SV40
Reverse Transkriptase
Negativ
Produkte
T

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
0,5 bis 3 x 104 Zellen/cm2
Flüssigkeitswechsel
2 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 48 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und anhaften lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
Schweizer Albino
Alter des Spenders
Embryo