Mine otse sisu juurde
3T3-Swiss Albino
Kude
Embrüonaalne
Sünonüümid
3T3 Swiss Albino, 3T3, Swiss-3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

Dokumendid

3T3-Swiss Albino

Cell line · Toote number 400103

The 3T3-Swiss Albino cell line is a fibroblast cell line derived from the tissues of a Swiss albino mouse embryo. Developed in the 1960s by George Todaro ...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

3T3-Swiss Albino rakuliin on fibroblastide rakuliin, mis on saadud Šveitsi albiino hiire embrüo kudedest. George Todaro ja Howard Green arendasid selle liini välja 1960. aastatel ja see oli üks esimesi, mis loodi fibroblastide pikaajalise kasvatamise ja uurimise eesmärgil. Nimi „3T3” viitab nende rakkude subkultiveerimiseks kasutatavale protokollile: „3” päeva intervall ja „T3” rakkude külvamise populatsiooni tihedus (3 x 105 rakku 20 cm² kolbi kohta).

3T3-Swiss Albino rakke kasutatakse tavaliselt mudelisüsteemina fibroblastide bioloogia uurimiseks, sealhulgas rakkude vananemise, transformatsiooni ja erinevate ravimite ja toksiinide mõju uurimiseks rakkude tervisele ja replikatsioonile. Need rakud on eriti tuntud oma vastupidavuse ja usaldusväärsuse poolest erinevate imetajate viiruste replikatsiooni toetamisel ja viirusvaktsiinide tootmisel. Lisaks on need rakud olulised vähiuuringutes, pakkudes järjepidevat mudelit onkogeneesi rakuliste mehhanismide ja vähirakkude interaktsiooni sidekoe keskkonnaga uurimiseks.

Geneetiliselt iseloomustab 3T3-Swiss Albino rakke stabiilne kariotüüp, mis hõlbustab nende kasutamist geneetilistes uuringutes. Need rakud on väga hästi kohandatavad erinevate in vitro tingimustega, mis muudab need äärmiselt väärtuslikuks geneetilistes, tsütoloogilistes ja biokeemilistes uuringutes. Nende rolli biomeditsiiniliste uuringute arengus ei saa ülehinnata, kuna need annavad olulist teavet rakkude protsesside ja potentsiaalsete ravivõimaluste kohta erinevate haiguste puhul.

Kude
Embrüonaalne
Rakendused
Neid rakke on kasutatud vähktõve arengu ja progresseerumise, embrüonaalse arengu ja diferentseerumise, rakkude kasvu ja diferentseerumisega seotud signaaliteede uurimiseks ning monoklonaalsete antikehade tootmise ja rekombinantse valgu ekspressiooni substraadina tootmiseks ja puhastamiseks.
Sünonüümid
  • 3T3 Swiss Albino
  • 3T3
  • Swiss-3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Fibroblastide
Tuumorigeenne
Ei
Ploidsus
Hüpertriploidne
Karyotüüp
2n=40
Kahekordistumisaeg
18 tundi

04Tunnused

Viide
3T3-Šveitsi albiino (Cytion katalooginumber 400103)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_0120

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
Testitud ja leitud negatiivseks ektromelia viiruse (hiirekatku) suhtes.
Viirusele vastuvõtlikkus
Polüomaviirus, SV40
Pöördtranskriptaas
Negatiivne
Tooted
T

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
0,5 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 48 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
Šveitsi albiino
Doonori vanus
Embrüo