Pereiti prie turinio
3T3-Swiss Albino
Audinys
Embrioninis
Sinonimai
3T3 Swiss Albino, 3T3, Swiss-3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

Dokumentai

3T3-Swiss Albino

Cell line · Prekės numeris 400103

The 3T3-Swiss Albino cell line is a fibroblast cell line derived from the tissues of a Swiss albino mouse embryo. Developed in the 1960s by George Todaro ...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

3T3-Swiss Albino ląstelių linija yra fibroblastų ląstelių linija, gauta iš Šveicarijos albinosų pelių embrionų audinių. Ši linija, sukurta 1960 m. George'o Todaro ir Howard'o Green'o, buvo viena iš pirmųjų, sukurta ilgalaikiam fibroblastų ląstelių auginimui ir tyrimams. Pavadinimas „3T3“ reiškia protokolą, naudojamą šių ląstelių subkultūrai: „3“ dienų intervalas ir „T3“ – populiacijos tankis, kuriuo ląstelės buvo pasėtos (3 x 105 ląstelės 20 cm² kolboje).

3T3-Swiss Albino ląstelės dažniausiai naudojamos kaip modelinė sistema fibroblastų biologijos tyrimams, įskaitant ląstelių senėjimą, transformaciją ir įvairių vaistų bei toksinų poveikį ląstelių sveikatai ir replikacijai. Jos ypač žinomos dėl savo tvirtumo ir patikimumo palaikant įvairių žinduolių virusų replikaciją ir gaminant virusines vakcinas. Be to, šios ląstelės yra labai svarbios vėžio tyrimams, nes jos yra nuoseklus modelis, leidžiantis tirti onkogenezės ląstelių mechanizmus ir vėžio ląstelių sąveiką su jungiamojo audinio aplinka.

Genetiškai 3T3-Swiss Albino ląstelės pasižymi stabiliu kariotipu, kuris palengvina jų naudojimą genetiniuose tyrimuose. Jos labai prisitaiko prie įvairių in vitro sąlygų, todėl yra ypač vertingos genetiniams, citologiniams ir biocheminiams tyrimams. Jų vaidmuo biomedicininių tyrimų plėtojime yra neįkainojamas, nes jos suteikia svarbių įžvalgų apie ląstelių procesus ir potencialius terapinius tikslus įvairių ligų atveju.

Audinys
Embrioninis
Paraiškos
Šios ląstelės buvo naudojamos vėžio vystymosi ir progresavimo, embrionų vystymosi ir diferenciacijos, signalinių kelių, dalyvaujančių ląstelių procesuose, pvz., ląstelių augime ir diferenciacijoje, tyrimams, taip pat kaip substratas monokloninių antikūnų gamybai ir rekombinantinių baltymų ekspresijai gamybai ir gryninimui.
Sinonimai
  • 3T3 Swiss Albino
  • 3T3
  • Swiss-3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus
Ląstelių tipas
Fibroblastai
Tumorogeninis
Ne
Ploidijos būklė
Hipertriploidinis
Kariotipas
2n=40
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
18 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
3T3-Šveicarijos albinosas (Cytion katalogo numeris 400103)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_0120

05Išraiška ir jautrumas

Virusai
Išbandytas ir nustatytas neigiamas rezultatas dėl ektromelijos viruso (pelės raupų).
Jautrumas virusams
Polomavirusas, SV40
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas
Produktai
T

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
0,5–3 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 48 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
Šveicarijos albinosai
Donoro amžius
Embrionas