Přejít na obsah
3T3-Swiss Albino
Tkáň
Embryonální
Synonyma
3T3 Swiss Albino, 3T3, Swiss-3T3, Swiss 3T3, Swiss3T3

Dokumenty

3T3-Swiss Albino

Cell line · Číslo výrobku 400103

The 3T3-Swiss Albino cell line is a fibroblast cell line derived from the tissues of a Swiss albino mouse embryo. Developed in the 1960s by George Todaro ...

€800.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie 3T3-Swiss Albino je linie fibroblastů odvozená z tkání embrya myši Swiss Albino. Tato linie, vyvinutá v 60. letech 20. století Georgem Todarem a Howardem Greenem, byla jednou z prvních linií vytvořených za účelem dlouhodobé kultivace a výzkumu fibroblastů. Název „3T3“ odkazuje na protokol používaný pro subkultivaci těchto buněk: „3“ dny interval a „T3“ pro populační hustotu, při které byly buňky vysety (3 x 105 buněk na 20 cm² baňku).

Buňky 3T3-Swiss Albino se běžně používají jako modelový systém pro studium biologie fibroblastů, včetně buněčného stárnutí, transformace a účinků různých léčiv a toxinů na zdraví a replikaci buněk. Jsou zvláště známé svou robustností a spolehlivostí při podpoře replikace různých savčích virů a při výrobě virových vakcín. Kromě toho jsou tyto buňky nepostradatelné ve výzkumu rakoviny, kde poskytují konzistentní model pro zkoumání buněčných mechanismů onkogeneze a interakce rakovinných buněk s prostředím pojivové tkáně.

Geneticky se buňky 3T3-Swiss Albino vyznačují stabilním karyotypem, což usnadňuje jejich použití v genetických studiích. Jsou vysoce přizpůsobivé různým podmínkám in vitro, což je činí mimořádně cennými pro genetické, cytologické a biochemické studie. Jejich role ve vývoji biomedicínského výzkumu nelze přecenit, protože poskytují zásadní poznatky o buněčných procesech a potenciálních terapeutických cílech u různých onemocnění.

Tkáň
Embryonální
Aplikace
Tyto buňky byly použity ke studiu vývoje a progrese rakoviny, embryonálního vývoje a diferenciace, signálních drah zapojených do buněčných procesů, jako je buněčný růst a diferenciace, a jako substrát pro výrobu monoklonálních protilátek a expresi rekombinantních proteinů pro výrobu a purifikaci.
Synonyma
  • 3T3 Swiss Albino
  • 3T3
  • Swiss-3T3
  • Swiss 3T3
  • Swiss3T3

02Klasifikace

Organismus
Myš
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblastům podobné
Typ buňky
Fibroblasty
Tumorogenní
Ne
Ploidní stav
Hypertriploidní
Karyotyp
2n=40
Doba zdvojnásobení
18 hodin

04Identifikátory

Citace
3T3-Swiss Albino (katalogové číslo Cytion 400103)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0120

05Exprese a náchylnost

Viry
Testy na virus ektromelie (myší neštovice) byly negativní.
Náchylnost k virům
Polyomavirus, SV40
Reverzní transkriptáza
Negativní
Produkty
T

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
0,5 až 3 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 48 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Plemeno / poddruh
Švýcarský albín
Věk dárce
Embrya