الانتقال إلى المحتوى
خلايا KG-1a
الأنسجة
النخاع العظمي
المرض
ابيضاض الدم النقوي الحاد
المرادفات
KG-1A, KG1A, KG1a

المستندات

خلايا KG-1a

Cell line · رقم المنتج 300234

سلسلة الخلايا KG-1a هي سلسلة فرعية مشتقة من سلسلة الخلايا KG-1 الأصلية، التي تم إنشاؤها من نخاع عظم مريض تم تشخيصه بمرض عضلي حاد...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خط خلايا KG-1a هو سلالة فرعية مشتقة من خط خلايا KG-1 الأصلي الذي تم إنشاؤه من نخاع عظم مريض تم تشخيص إصابته بسرطان الدم النخاعي الحاد (AML). تُصنف خلايا KG-1a على أنها خط خلايا ابيضاض الدم النخاعي البشري وتتميز بشكل خاص بحالتها غير الناضجة وغير المتمايزة. وخلافاً لخلايا KG-1 الأم، التي تكون في مرحلة الأرومة النخاعية في المقام الأول، تُظهر خلايا KG-1a نمطاً ظاهرياً أكثر بدائية، تشبه الخلايا البدائية النخاعية المبكرة أو حتى الخلايا الجذعية. وهذا يجعلها أداة لا تقدر بثمن لدراسة تكون الدم وتطور سرطان الدم والآليات الجزيئية الكامنة وراء التمايز النخاعي.

تعبّر خلايا KG-1a عن العديد من العلامات السطحية النموذجية للسلف المكونة للدم في وقت مبكر، مثل CD34 وCD38 وHLA-DR، بينما تفتقر إلى العلامات المرتبطة بالخلايا النخاعية الناضجة. هذا المظهر يجعلها مناسبة للغاية للبحث في بيولوجيا الخلايا الجذعية وتطوير علاجات سرطان الدم. بالإضافة إلى ذلك، غالبًا ما تُستخدم خلايا KG-1a في فحوصات فحص الأدوية لتقييم فعالية المركبات المحتملة المضادة لسرطان الدم، خاصة تلك التي تستهدف الخلايا الجذعية لسرطان الدم. كما توفر قدرتها على الحفاظ على حالة غير متمايزة في المختبر نموذجاً قوياً لدراسات التعبير الجيني والمقايسات الوظيفية المتعلقة بالتسبب في سرطان الدم.

وكما هو الحال مع سلالات الخلايا الأخرى المشتقة من الأنسجة البشرية، فإن خلايا KG-1a مخصصة للاستخدام البحثي فقط وليست مناسبة للتطبيقات العلاجية أو في الجسم الحي. وهي تتطلب معالجة دقيقة في ظروف معقمة وخصائص نموها تستلزم ظروف زراعة محددة، بما في ذلك استخدام وسط RPMI-1640 المضاف إليه مصل البقر الجنيني. يمكن للباحثين الذين يستخدمون خط الخلايا KG-1a أن يكتسبوا رؤى مهمة في المراحل المبكرة من التحول اللوكيميائي ودور السلائف المكونة للدم في بيولوجيا السرطان.

الأنسجة
النخاع العظمي
المرض
ابيضاض الدم النقوي الحاد
المرادفات
  • KG-1A
  • KG1A
  • KG1a

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

نوع الخلية
المايلوبلاست
زمن المضاعفة
45 ساعة

04المعرّفات

المرجع
KG-1a (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300234)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1824

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
HLA A30، A31، B35، Cw4
الإيزوزيمات
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 0, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 0, GLO-1, 2
الفيروسات
الحمض النووي البروتيني الكهرومغناطيسي (EBNA): سلبي
إنزيم النسخ العكسي
سلبي

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
IMDM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 ميلي مولار جلوتامين، ث: 25 ميلي مولار هيبيس (HEPES)، ث: 1.0 ميلي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 3.024 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820800a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
إعادة الاستنبات
انقل المعلق الخلوي إلى أنابيب طرد مركزي معقمة. اجمع الخلايا عن طريق الدوران بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من الطبقة العائمة وأعد تعليق الخلايا المترسبة في وسط استزراع خلوي جديد. اضبط الكثافة الخلوية المثلى بين 1 - 3 × 105 خلية/مل. قسّم الخلايا عند الوصول إلى الكثافة الخلوية القصوى 1 - 2 × 106 خلية/مل.
تجديد السوائل
كل 3 أيام
التعافي بعد ذوبان الجليد
اسمح للخلايا بالتعافي من عملية التجميد لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
59 سنة
الأصل العرقي
قوقازي