Mine otse sisu juurde
KG-1a rakud
Kude
Luuüdi
Haigus
Äge müelogeenne leukeemia
Sünonüümid
KG-1A, KG1A, KG1a

Dokumendid

KG-1a rakud

Cell line · Toote number 300234

Rakuliin KG-1a on algsest KG-1 rakuliinist tuletatud alaliin, mis loodi ägeda müo... diagnoosiga patsiendi luuüdist...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

KG-1a rakuliin on alamliin, mis on saadud algsest KG-1 rakuliinist, mis loodi ägeda müeloidse leukeemiaga (AML) diagnoositud patsiendi luuüdist. KG-1a rakud liigitatakse inimese müeloidse leukeemia rakuliiniks ja neid iseloomustab eelkõige nende ebaküpsus ja diferentseerimata seisund. Erinevalt KG-1 vanemrakkudest, mis on peamiselt müeloblastide staadiumis, on KG-1a rakkudel primitiivsem fenotüüp, mis sarnaneb varajaste müeloidsete progenitoride või isegi tüvirakkudega. See muudab nad hindamatuks vahendiks hematopoeesia, leukeemia progresseerumise ja müeloidse diferentseerumise aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimisel.

KG-1a rakud väljendavad mitmeid varastele hematopoeetilistele eellastele iseloomulikke pinnamarkereid, nagu CD34, CD38 ja HLA-DR, kuid neil puuduvad küpsete müeloidsete rakkudega seotud markerid. See profiil muudab need rakud väga sobivaks tüvirakkude bioloogia uurimiseks ja leukeemiaravimite väljatöötamiseks. Lisaks kasutatakse KG-1a rakke sageli ravimite sõeluuringutes, et hinnata potentsiaalsete leukeemiavastaste ühendite tõhusust, eriti nende, mis on suunatud leukeemilistele tüvirakkudele. Nende võime säilitada diferentseerimata seisundit in vitro annab ka tugeva mudeli geeniekspressiooni uuringuteks ja leukeemia patogeneesiga seotud funktsionaalseteks katsetusteks.

Nagu teisedki inimkoest saadud rakuliinid, on KG-1a rakud mõeldud ainult teaduslikuks kasutamiseks ja ei sobi terapeutilisteks või in vivo rakendusteks. Nad vajavad hoolikat käitlemist steriilsetes tingimustes ja nende kasvutingimused nõuavad spetsiifilisi kasvatustingimusi, sealhulgas RPMI-1640 söötme kasutamist, millele on lisatud veisefetaalset seerumit. KG-1a rakuliini kasutavad teadlased saavad olulist teavet leukeemilise transformatsiooni varajaste etappide ja vereloome eellaste rolli kohta vähi bioloogias.

Kude
Luuüdi
Haigus
Äge müelogeenne leukeemia
Sünonüümid
  • KG-1A
  • KG1A
  • KG1a

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Rakutüüp
Müeloblast
Kahekordistumisaeg
45 tundi

04Tunnused

Viide
KG-1a (Cytioni katalooginumber 300234)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1824

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
HLA A30, A31, B35, Cw4
Isoensüümid
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 0, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 0, GLO-1, 2
Viirused
EBNA (EBNA ): negatiivne
Pöördtranskriptaas
Negatiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
IMDM, w: 4,5 g/L glükoos, w: 4 mM L-glutamiin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820800a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Kanna rakususpensioon steriilsetesse tsentrifuugitorudesse. Koguge rakud, tsentrifuugides 300xg kiirusel 3 minutit. Viskake supernatant ära ja suspendeerige pelletitud rakud uues rakukultuurikeskkonnas. Reguleerige optimaalseks rakutiheduseks 1–3 x 105 rakku/ml. Jagage rakud, kui maksimaalne rakutihedus 1–2 x 106 rakku/ml on saavutatud.
Vedeliku vahetus
Iga 3 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Laske rakkudel vähemalt 24 tundi külmutamisest taastuda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
59 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia