Gå direkte til indholdet
KG-1a-celler
Væv
Knoglemarv
Sygdom
Akut myelogen leukæmi
Synonymer
KG-1A, KG1A, KG1a

Dokumenter

KG-1a-celler

Cell line · Varenummer 300234

KG-1a-cellelinjen er en underlinje, der stammer fra den oprindelige KG-1-cellelinje, som blev etableret ud fra knoglemarven fra en patient, der var blevet diagnosticeret med akut my...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

KG-1a-cellelinjen er en sublinje, der stammer fra den oprindelige KG-1-cellelinje, som blev etableret fra knoglemarven hos en patient, der var diagnosticeret med akut myeloid leukæmi (AML). KG-1a-celler er klassificeret som en human myeloid leukæmicellelinje og er især kendetegnet ved deres umodne, udifferentierede tilstand. I modsætning til de oprindelige KG-1-celler, som primært er i myeloblaststadiet, udviser KG-1a-cellerne en mere primitiv fænotype, der ligner tidlige myeloide progenitorer eller endda stamceller. Det gør dem til et uvurderligt værktøj til at studere hæmatopoiesis, leukæmiudvikling og de molekylære mekanismer, der ligger til grund for myeloid differentiering.

KG-1a-celler udtrykker forskellige overflademarkører, der er typiske for tidlige hæmatopoietiske progenitorer, såsom CD34, CD38 og HLA-DR, mens de mangler markører, der er forbundet med modne myeloide celler. Denne profil gør dem yderst velegnede til forskning i stamcellebiologi og udvikling af leukæmiterapier. Derudover bruges KG-1a-celler ofte i tests til screening af lægemidler for at evaluere effekten af potentielle antileukæmiske forbindelser, især dem, der er rettet mod leukæmiske stamceller. Deres evne til at opretholde en udifferentieret tilstand in vitro giver også en robust model til genekspressionsstudier og funktionelle analyser relateret til leukæmipatogenese.

Som med andre cellelinjer, der stammer fra humant væv, er KG-1a-celler kun beregnet til forskningsbrug og er ikke egnede til terapeutiske eller in vivo-anvendelser. De kræver omhyggelig håndtering under sterile forhold, og deres vækstegenskaber kræver specifikke dyrkningsbetingelser, herunder brug af RPMI-1640-medium suppleret med føtalt bovint serum. Forskere, der bruger KG-1a-cellelinjen, kan få betydelig indsigt i de tidlige stadier af leukæmisk transformation og de hæmatopoietiske progenitorers rolle i kræftbiologien.

Væv
Knoglemarv
Sygdom
Akut myelogen leukæmi
Synonymer
  • KG-1A
  • KG1A
  • KG1a

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Celletype
Myeloblast
Fordoblingstid
45 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KG-1a (Cytion katalognummer 300234)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1824

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
HLA A30, A31, B35, Cw4
Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 0, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 0, GLO-1, 2
Vira
EBNA (EBNA ): negativ
Revers transkriptase
Negativ

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
IMDM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820800a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Oddyrkning
Overfør cellesuspensionen til sterile centrifugerør. Opsaml cellerne ved at centrifugere ved 300 x g i 3 minutter. Kassér supernatanten og resuspender de pelleterede celler i frisk cellekulturmedium. Juster til en optimal celletæthed mellem 1 og 3 x 105 celler/ml. Del cellerne, når en maksimal celletæthed på 1 til 2 x 106 celler/ml er nået.
Væskeudskiftning
Hver 3. dag
Genopretning efter optøning
Lad cellerne komme sig efter nedfrysningen i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
59 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk