Přejít na obsah
Buňky KG-1a
Tkáň
Kostní dřeň
Nemoc
Akutní myelogenní leukémie
Synonyma
KG-1A, KG1A, KG1a

Dokumenty

Buňky KG-1a

Cell line · Číslo výrobku 300234

Buněčná linie KG-1a je podlinie odvozená od původní buněčné linie KG-1, která byla izolována z kostní dřeně pacienta s diagnózou akutní my...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie KG-1a je podlinie odvozená od původní buněčné linie KG-1, která byla vytvořena z kostní dřeně pacienta s diagnózou akutní myeloidní leukémie (AML). Buňky KG-1a jsou klasifikovány jako buněčná linie lidské myeloidní leukemie a vyznačují se zejména nezralým, nediferencovaným stavem. Na rozdíl od mateřských buněk KG-1, které jsou primárně ve stadiu myeloblastu, vykazují buňky KG-1a primitivnější fenotyp, připomínající rané myeloidní progenitory nebo dokonce kmenové buňky. To z nich činí neocenitelný nástroj pro studium krvetvorby, progrese leukémie a molekulárních mechanismů, které jsou základem myeloidní diferenciace.

Buňky KG-1a exprimují různé povrchové markery typické pro časné hematopoetické progenitory, jako jsou CD34, CD38 a HLA-DR, zatímco postrádají markery spojené se zralými myeloidními buňkami. Díky tomuto profilu jsou velmi vhodné pro výzkum biologie kmenových buněk a vývoj terapie leukémie. Kromě toho se buňky KG-1a často používají ve screeningových testech léčiv k hodnocení účinnosti potenciálních antileukemických sloučenin, zejména těch, které jsou zaměřeny na leukemické kmenové buňky. Jejich schopnost udržovat nediferencovaný stav in vitro také poskytuje robustní model pro studie genové exprese a funkční testy související s patogenezí leukémie.

Stejně jako ostatní buněčné linie odvozené z lidské tkáně jsou buňky KG-1a určeny pouze pro výzkumné použití a nejsou vhodné pro terapeutické nebo in vivo aplikace. Vyžadují pečlivé zacházení za sterilních podmínek a jejich růstové vlastnosti vyžadují specifické kultivační podmínky, včetně použití média RPMI-1640 doplněného fetálním hovězím sérem. Výzkumníci využívající buněčnou linii KG-1a mohou získat významné poznatky o časných stadiích leukemické transformace a o úloze hematopoetických progenitorů v biologii rakoviny.

Tkáň
Kostní dřeň
Nemoc
Akutní myelogenní leukémie
Synonyma
  • KG-1A
  • KG1A
  • KG1a

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Odpružení
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Typ buňky
Myeloblasty
Doba zdvojnásobení
45 hodin

04Identifikátory

Citace
KG-1a (katalogové číslo Cytion 300234)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1824

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
HLA A30, A31, B35, Cw4
Isoenzymy
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 0, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 0, GLO-1, 2
Viry
EBNA (EBNA ): negativní
Reverzní transkriptáza
Negativní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
IMDM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM pyruvátu sodného, w: 3,024 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820800a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Subkultivace
Přemístěte buněčnou suspenzi do sterilních odstředivkových zkumavek. Buňky shromážděte odstředěním při 300xg po dobu 3 minut. Odstraňte supernatant a resuspendujte peletizované buňky v čerstvém buněčném kultivačním médiu. Upravte na optimální buněčnou hustotu mezi 1 - 3 x 105 buněk/ml. Rozdělte buňky, když je dosaženo maximální buněčné hustoty 1 - 2 x 106 buněk/ml.
Obnova tekutin
Každé 3 dny
Zotavení po rozmrazení
Nechte buňky po zmrazení alespoň 24 hodin zotavit.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
59 let
Etnická příslušnost
Kavkazský