Gå til innholdet
KG-1a-celler
Vev
Benmarg
Sykdom
Akutt myelogen leukemi
Synonymer
KG-1A, KG1A, KG1a

Dokumenter

KG-1a-celler

Cell line · Produktnummer 300234

KG-1a-cellelinjen er en underlinje avledet fra den opprinnelige KG-1-cellelinjen, som ble etablert fra benmargen til en pasient diagnostisert med akutt my...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

KG-1a-cellelinjen er en sublinje avledet fra den opprinnelige KG-1-cellelinjen, som ble etablert fra benmargen til en pasient som ble diagnostisert med akutt myeloid leukemi (AML). KG-1a-celler er klassifisert som en human myeloid leukemi-cellelinje og kjennetegnes spesielt ved sin umodne, udifferensierte tilstand. I motsetning til KG-1-cellene, som primært befinner seg i myeloblaststadiet, har KG-1a-cellene en mer primitiv fenotype, som ligner på tidlige myeloide progenitorer eller til og med stamceller. Dette gjør dem til et uvurderlig verktøy for studier av hematopoiesis, leukemiutvikling og de molekylære mekanismene som ligger til grunn for myeloid differensiering.

KG-1a-celler uttrykker ulike overflatemarkører som er typiske for tidlige hematopoietiske progenitorer, som CD34, CD38 og HLA-DR, mens de mangler markører som assosieres med modne myeloide celler. Denne profilen gjør dem svært godt egnet for forskning på stamcellebiologi og utvikling av leukemibehandlinger. I tillegg brukes KG-1a-celler ofte i screeninganalyser for å evaluere effekten av potensielle antileukemiske forbindelser, spesielt de som er rettet mot leukemiske stamceller. Cellenes evne til å opprettholde en udifferensiert tilstand in vitro gjør dem også til en robust modell for genekspresjonsstudier og funksjonelle analyser knyttet til leukemipatogenese.

I likhet med andre cellelinjer som stammer fra humant vev, er KG-1a-celler kun beregnet på forskningsbruk og egner seg ikke til terapeutisk bruk eller in vivo-bruk. De må håndteres forsiktig under sterile forhold, og deres vekstegenskaper krever spesifikke dyrkingsforhold, inkludert bruk av RPMI-1640-medium supplert med føtalt bovint serum. Forskere som bruker KG-1a-cellelinjen, kan få betydelig innsikt i de tidlige stadiene av leukemisk transformasjon og den rollen hematopoetiske progenitorer spiller i kreftbiologien.

Vev
Benmarg
Sykdom
Akutt myelogen leukemi
Synonymer
  • KG-1A
  • KG1A
  • KG1a

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Celletype
Myeloblast
Fordoblingstid
45 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
KG-1a (Cytion-katalognummer 300234)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1824

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
HLA A30, A31, B35, Cw4
Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 0, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 0, GLO-1, 2
Virus
EBNA (EBNA ): negativ
Revers transkriptase
Negativ

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
IMDM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820800a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Subkultivering
Overfør cellesuspensjonen til sterile sentrifugerør. Samle cellene ved å sentrifugere ved 300 x g i 3 minutter. Kast supernatanten og resuspender de pelletiserte cellene i ferskt cellekulturmedium. Juster til en optimal celletetthet mellom 1 og 3 x 105 celler/ml. Del cellene når en maksimal celletetthet på 1 til 2 x 106 celler/ml er nådd.
Væskefornyelse
Hver tredje dag
Gjenoppretting etter tining
La cellene restituere seg fra fryseprosessen i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
59 år
Etnisitet
Kaukasisk