Pāriet uz saturu
KG-1a šūnas
Audums
Kaulu smadzenes
Slimība
Akūta mielogēna leikēmija
Sinonīmi
KG-1A, KG1A, KG1a

Dokumenti

KG-1a šūnas

Cell line · Preces numurs 300234

Šūnu līnija KG-1a ir apakšlīnija, kas iegūta no sākotnējās KG-1 šūnu līnijas, kura tika izveidota no tā pacienta kaulu smadzenēm, kuram tika diagnosticēta akūta mi...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

KG-1a šūnu līnija ir apakšlīnija, kas atvasināta no oriģinālās KG-1 šūnu līnijas, kura tika iegūta no pacienta, kam diagnosticēta akūta mieloīdo leikēmija (AML), kaulu smadzenēm. KG-1a šūnas klasificē kā cilvēka mieloīdās leikēmijas šūnu līniju, un tām ir īpaši raksturīgs nenobriedis, nediferencēts stāvoklis. Atšķirībā no mātes KG-1 šūnām, kas galvenokārt ir mieloblastu stadijā, KG-1a šūnām piemīt primitīvāks fenotips, kas atgādina agrīnos mieloīdu progenitorus vai pat cilmes šūnas. Tas padara tās par nenovērtējamu līdzekli asinsrades, leikēmijas progresēšanas un mieloīdu diferenciācijas molekulāro mehānismu izpētei.

KG-1a šūnas ekspresē dažādus virsmas marķierus, kas raksturīgi agrīnajiem hematopoētiskajiem progenitoriem, piemēram, CD34, CD38 un HLA-DR, bet tām trūkst marķieru, kas saistīti ar nobriedušām mieloīdām šūnām. Šis profils padara tās ļoti piemērotas cilmes šūnu bioloģijas izpētei un leikēmijas terapijas izstrādei. Turklāt KG-1a šūnas bieži izmanto zāļu skrīninga testos, lai novērtētu potenciālo pretleikēmisko savienojumu efektivitāti, jo īpaši to, kas vērsti pret leikēmiskajām cilmes šūnām. To spēja saglabāt nediferencētu stāvokli in vitro nodrošina arī stabilu modeli gēnu ekspresijas pētījumiem un funkcionāliem testiem, kas saistīti ar leikēmijas patoģenēzi.

Tāpat kā citas šūnu līnijas, kas iegūtas no cilvēka audiem, KG-1a šūnas ir paredzētas tikai pētniecībai un nav piemērotas terapeitiskiem vai in vivo lietojumiem. Ar tām ir jārīkojas uzmanīgi, ievērojot sterilitāti, un to augšanas īpatnību dēļ ir nepieciešami īpaši kultivēšanas apstākļi, tostarp RPMI-1640 barotnes izmantošana, kas papildināta ar fetālo liellopu serumu. Pētnieki, izmantojot KG-1a šūnu līniju, var gūt nozīmīgu ieskatu par leikēmiskās transformācijas agrīnajām stadijām un hematopoētisko progenitoru lomu vēža bioloģijā.

Audums
Kaulu smadzenes
Slimība
Akūta mielogēna leikēmija
Sinonīmi
  • KG-1A
  • KG1A
  • KG1a

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Šūnu tips
Mieloblasti
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
45 stundas

04Identifikatori

Atsauce
KG-1a (Cytion kataloga numurs 300234)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1824

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
HLA A30, A31, B35, Cw4
Izoenzīmi
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 0, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 0, GLO-1, 2
Vīrusi
EBNA (EBNA ): negatīvs
Reversā transkriptāze
Negatīvs

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
IMDM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM nātrija piruvāta, w: 3,024 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820800a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Pārstādīšana
Pārnesiet šūnu suspensiju sterilizētās centrifūgas caurulītēs. Savāciet šūnas, centrifugējot 300xg 3 minūtes. Izlejiet supernatantu un atkārtoti suspendējiet nogulsnētās šūnas svaigā šūnu kultūras vidē. Noregulējiet optimālo šūnu blīvumu 1–3 x 105 šūnas/ml. Sadaliet šūnas, kad sasniegts maksimālais šūnu blīvums 1–2 x 106 šūnas/ml.
Šķidruma atjaunošana
Ik pēc 3 dienām
Atgūšanās pēc atkusņa
Ļaujiet šūnām atgūties pēc sasaldēšanas procesa vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
59 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis