Prejsť na obsah
KG-1a Bunky
Tkanivo
Kostná dreň
Choroba
Akútna myelogénna leukémia
Synonymá
KG-1A, KG1A, KG1a

Dokumenty

KG-1a Bunky

Cell line · Číslo výrobku 300234

Buněčná línia KG-1a je podlínia odvodená od pôvodnej buneckej línie KG-1, ktorá bola získaná z kostnej drene pacienta s diagnózou akútnej my...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia KG-1a je sublínia odvodená od pôvodnej bunkovej línie KG-1, ktorá bola vytvorená z kostnej drene pacienta s diagnózou akútnej myeloidnej leukémie (AML). Bunky KG-1a sú klasifikované ako bunkové línie ľudskej myeloidnej leukémie a vyznačujú sa najmä nezrelým, nediferencovaným stavom. Na rozdiel od materských buniek KG-1, ktoré sú primárne v štádiu myeloblastu, bunky KG-1a vykazujú primitívnejší fenotyp, pripomínajúci skoré myeloidné progenitory alebo dokonca kmeňové bunky. To z nich robí neoceniteľný nástroj na štúdium krvotvorby, progresie leukémie a molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom diferenciácie myeloidov.

KG-1a bunky exprimujú rôzne povrchové markery typické pre skoré hematopoetické progenitory, ako sú CD34, CD38 a HLA-DR, pričom im chýbajú markery spojené so zrelými myeloidnými bunkami. Vďaka tomuto profilu sú veľmi vhodné na výskum biológie kmeňových buniek a vývoj terapií leukémie. Okrem toho sa bunky KG-1a často používajú v testoch skríningu liekov na hodnotenie účinnosti potenciálnych antileukemických zlúčenín, najmä tých, ktoré sú zamerané na leukemické kmeňové bunky. Ich schopnosť udržiavať nediferencovaný stav in vitro tiež poskytuje robustný model pre štúdie génovej expresie a funkčné testy súvisiace s patogenézou leukémie.

Tak ako iné bunkové línie odvodené z ľudského tkaniva, aj bunky KG-1a sú určené len na výskumné účely a nie sú vhodné na terapeutické alebo in vivo aplikácie. Vyžadujú si opatrné zaobchádzanie v sterilných podmienkach a ich rastové vlastnosti si vyžadujú špecifické kultivačné podmienky vrátane použitia média RPMI-1640 doplneného fetálnym hovädzím sérom. Výskumníci využívajúci bunkovú líniu KG-1a môžu získať významné poznatky o včasných štádiách leukemickej transformácie a úlohe krvotvorných progenitorov v biológii rakoviny.

Tkanivo
Kostná dreň
Choroba
Akútna myelogénna leukémia
Synonymá
  • KG-1A
  • KG1A
  • KG1a

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Typ bunky
Myeloblast
Doba zdvojnásobenia
45 hodín

04Identifikátory

Citácia
KG-1a (katalógové číslo Cytion 300234)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1824

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
HLA A30, A31, B35, Cw4
Izoenzýmy
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 0, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 0, GLO-1, 2
Vírusy
EBNA (EBNA ): negatívny
Reverzná transkriptáza
Negatívne

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
IMDM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM pyruvátu sodného, w: 3,024 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820800a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Rozmnožovanie kultúr
Preneste suspenziu buniek do sterilných centrifugačných skúmaviek. Zberajte bunky odstredovaním pri 300 x g počas 3 minút. Zlikvidujte supernatant a resuspendujte usadené bunky v čerstvom kultivačnom médiu. Nastavte optimálnu hustotu buniek na 1 – 3 x 105 buniek/ml. Rozdeľte bunky, keď dosiahnete maximálnu hustotu buniek 1 – 2 x 106 buniek/ml.
Obnova kvapaliny
Každé 3 dni
Zotavenie po rozmrazení
Nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazovania aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
59 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský