Preskoči na vsebino
Celice KG-1a
Tkivo
Kostni mozeg
Bolezen
Akutna mielozna levkemija
Sinonimi
KG-1A, KG1A, KG1a

Dokumenti

Celice KG-1a

Cell line · Številka izdelka 300234

Celična linija KG-1a je podlinija, ki izhaja iz prvotne celične linije KG-1, vzpostavljene iz kostnega mozga bolnika, pri katerem je bila diagnosticirana akutna mi...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija KG-1a je podlinija, pridobljena iz prvotne celične linije KG-1, ki je bila pridobljena iz kostnega mozga bolnika z diagnozo akutne mieloične levkemije (AML). Celice KG-1a so uvrščene med celične linije človeške mieloične levkemije, za katere je značilno predvsem njihovo nezrelo, nediferencirano stanje. Za razliko od matičnih celic KG-1, ki so predvsem v fazi mieloblastov, imajo celice KG-1a bolj primitiven fenotip in so podobne zgodnjim mieloidnim progenitorjem ali celo matičnim celicam. Zato so neprecenljivo orodje za preučevanje krvotvorbe, napredovanja levkemije in molekularnih mehanizmov, na katerih temelji diferenciacija mieloidov.

Celice KG-1a izražajo različne površinske označevalce, značilne za zgodnje krvotvorne progenitorje, kot so CD34, CD38 in HLA-DR, medtem ko nimajo označevalcev, povezanih z zrelimi mieloidnimi celicami. Zaradi tega profila so zelo primerne za raziskave biologije matičnih celic in razvoj terapij za zdravljenje levkemije. Poleg tega se celice KG-1a pogosto uporabljajo v testih za presejanje zdravil za oceno učinkovitosti potencialnih proti levkemičnih spojin, zlasti tistih, ki so usmerjene proti levkemičnim matičnim celicam. Njihova sposobnost ohranjanja nediferenciranega stanja in vitro zagotavlja tudi zanesljiv model za študije izražanja genov in funkcionalne preskuse, povezane s patogenezo levkemije.

Tako kot druge celične linije, pridobljene iz človeškega tkiva, so tudi celice KG-1a namenjene le za raziskovalno uporabo in niso primerne za terapevtsko uporabo ali uporabo in vivo. Z njimi je treba skrbno ravnati v sterilnih razmerah, njihove značilnosti rasti pa zahtevajo posebne pogoje gojenja, vključno z uporabo gojišča RPMI-1640, dopolnjenega s fetalnim govejim serumom. Raziskovalci, ki uporabljajo celično linijo KG-1a, lahko pridobijo pomemben vpogled v zgodnje faze levkemične transformacije in vlogo krvotvornih progenitorjev v biologiji raka.

Tkivo
Kostni mozeg
Bolezen
Akutna mielozna levkemija
Sinonimi
  • KG-1A
  • KG1A
  • KG1a

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Vrsta celice
Mieloblast
Čas podvojitve
45 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
KG-1a (kataloška številka Cytion 300234)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1824

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija antigena
HLA A30, A31, B35, Cw4
Izoenzimi
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 0, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 0, GLO-1, 2
Virusi
EBNA (EBNA ): negativen
Reversna transkriptaza
Negativni

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
IMDM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natrijevega piruvata, w: 3,024 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820800a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Preusmeritev v drugo kulturo
Prenesite celično suspenzijo v sterilne centrifugirne epruvete. Zberite celice s centrifugiranjem pri 300xg 3 minute. Odstranite supernatant in ponovno suspendirajte peletirane celice v svežem celičnem kultiviranem mediju. Prilagodite optimalno gostoto celic med 1 - 3 x 105 celic/ml. Razdelite celice, ko dosežete maksimalno gostoto celic 1 - 2 x 106 celic/ml.
Obnova tekočine
Vsakih 3 dni
Obnova po odtaljevanju
Počakajte vsaj 24 ur, da si celice opomorejo od zamrzovanja.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
59 let
Etnična pripadnost
Kavkaški