Siirry sisältöön
KG-1a-solut
Kudos
Luuydin
Sairaus
Akuutti myelogeeninen leukemia
Synonyymit
KG-1A, KG1A, KG1a

Asiakirjat

KG-1a-solut

Cell line · Tuotenumero 300234

KG-1a-solulinja on alalinja, joka on johdettu alkuperäisestä KG-1-solulinjasta, joka perustettiin potilaan luuytimestä, jolla oli diagnosoitu akuutti my...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

KG-1a-solulinja on alalinja, joka on peräisin alkuperäisestä KG-1-solulinjasta, joka on peräisin akuuttia myelooista leukemiaa (AML) sairastavan potilaan luuytimestä. KG-1a-solut luokitellaan ihmisen myelooiseksi leukemiasolulinjaksi, ja niille on erityisen ominaista niiden epäkypsä, erilaistumaton tila. Toisin kuin KG-1:n kantasoluilla, jotka ovat pääasiassa myeloblastivaiheessa, KG-1a-soluilla on primitiivisempi fenotyyppi, joka muistuttaa varhaisia myeloidisia esiasteita tai jopa kantasoluja. Tämä tekee niistä korvaamattoman arvokkaan välineen hematopoieesin, leukemian etenemisen ja myeloidien erilaistumisen taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimiseen.

KG-1a-solut ilmentävät varhaisille hematopoieettisille esiasteille tyypillisiä pintamerkkejä, kuten CD34, CD38 ja HLA-DR, mutta niistä puuttuvat kypsille myelooisille soluille ominaiset merkit. Tämän profiilin ansiosta ne soveltuvat erinomaisesti kantasolubiologian tutkimukseen ja leukemian hoitomuotojen kehittämiseen. Lisäksi KG-1a-soluja käytetään usein lääkeaineiden seulontamäärityksissä mahdollisten leukemian vastaisten yhdisteiden tehokkuuden arvioimiseksi, erityisesti niiden, jotka kohdistuvat leukemian kantasoluihin. Niiden kyky säilyttää erilaistumaton tila in vitro tarjoaa myös vankan mallin geeniekspressiotutkimuksiin ja leukemian patogeneesiin liittyviin toiminnallisiin kokeisiin.

Kuten muutkin ihmiskudoksesta peräisin olevat solulinjat, KG-1a-solut on tarkoitettu ainoastaan tutkimuskäyttöön, eivätkä ne sovellu terapeuttisiin tai in vivo -sovelluksiin. Ne vaativat huolellista käsittelyä steriileissä olosuhteissa, ja niiden kasvuominaisuudet edellyttävät erityisiä viljelyolosuhteita, kuten RPMI-1640-median käyttöä, jota on täydennetty naudan sikiöseerumilla. KG-1a-solulinjaa käyttävät tutkijat voivat saada merkittävää tietoa leukemian muuntumisen varhaisista vaiheista ja hematopoieettisten esiasteiden roolista syövän biologiassa.

Kudos
Luuydin
Sairaus
Akuutti myelogeeninen leukemia
Synonyymit
  • KG-1A
  • KG1A
  • KG1a

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Solutyyppi
Myeloblastit
Kaksinkertaistumisaika
45 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
KG-1a (Cytionin luettelonumero 300234)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1824

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
HLA A30, A31, B35, Cw4
Isoentsyymit
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 0, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 0, GLO-1, 2
Virukset
EBNA (EBNA ): negatiivinen
Käänteiskopioijaentsyymi
Negatiivinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
IMDM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 3,024 g/l NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820800a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Siirrä solususpensio steriileihin sentrifugiputkiin. Kerää solut sentrifugoimalla 300 x g:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti ja suspendoi pelletoituneet solut uudelleen tuoreeseen soluviljelyväliaineeseen. Säädä solutiheys optimaaliseksi, 1–3 x 105 solua/ml. Jaa solut, kun solutiheys on saavuttanut maksimiarvon 1–2 x 106 solua/ml.
Nesteen uusiminen
3 päivän välein
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Anna solujen palautua pakastuksesta vähintään 24 tuntia.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
59 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen