Ga naar de inhoud
KG-1a Cellen
Weefsel
Beenmerg
Ziekte
Acute myeloïde leukemie
Synoniemen
KG-1A, KG1A, KG1a

Documenten

KG-1a Cellen

Cell line · Productnummer 300234

De KG-1a-cellijn is een sublijn die is afgeleid van de oorspronkelijke KG-1-cellijn, die werd opgezet uit het beenmerg van een patiënt bij wie acute my...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De KG-1a-cellijn is een sublijn die is afgeleid van de oorspronkelijke KG-1-cellijn, die afkomstig is uit het beenmerg van een patiënt bij wie acute myeloïde leukemie (AML) is vastgesteld. KG-1a-cellen worden geclassificeerd als een humane myeloïde leukemiecellijn en worden met name gekenmerkt door hun onrijpe, ongedifferentieerde staat. In tegenstelling tot de ouder KG-1 cellen, die zich voornamelijk in het myeloblaststadium bevinden, vertonen KG-1a cellen een primitiever fenotype, dat lijkt op vroege myeloïde progenitors of zelfs stamcellen. Hierdoor zijn ze van onschatbare waarde voor het bestuderen van hematopoëse, leukemieprogressie en de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan myeloïde differentiatie.

KG-1a cellen drukken verschillende oppervlaktemarkers uit die typisch zijn voor vroege hematopoietische progenitors, zoals CD34, CD38 en HLA-DR, terwijl ze markers missen die geassocieerd worden met rijpe myeloïde cellen. Dit profiel maakt ze zeer geschikt voor onderzoek naar stamcelbiologie en de ontwikkeling van leukemietherapieën. Daarnaast worden KG-1a cellen vaak gebruikt bij het screenen van medicijnen om de werkzaamheid van potentiële anti-leukemische verbindingen te evalueren, met name verbindingen die gericht zijn op leukemische stamcellen. Hun vermogen om een ongedifferentieerde toestand in vitro te behouden, biedt ook een robuust model voor genexpressiestudies en functionele tests met betrekking tot de pathogenese van leukemie.

Net als andere cellijnen afgeleid van menselijk weefsel, zijn KG-1a cellen alleen bedoeld voor onderzoek en niet geschikt voor therapeutische of in vivo toepassingen. Ze moeten zorgvuldig worden behandeld onder steriele omstandigheden en hun groeikenmerken vereisen specifieke kweekomstandigheden, waaronder het gebruik van RPMI-1640 medium aangevuld met foetaal runderserum. Onderzoekers die gebruik maken van de KG-1a cellijn kunnen belangrijke inzichten krijgen in de vroege stadia van leukemische transformatie en de rol van hematopoietische progenitors in de biologie van kanker.

Weefsel
Beenmerg
Ziekte
Acute myeloïde leukemie
Synoniemen
  • KG-1A
  • KG1A
  • KG1a

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Ophanging
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Celtype
Myeloblasten
Verdubbelingstijd
45 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
KG-1a (Cytion catalogusnummer 300234)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1824

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
HLA A30, A31, B35, Cw4
Iso-enzymen
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 0, ES-D, 1, Me-2, 1, AK-1, 0, GLO-1, 2
Virussen
EBNA (EBNA ): negatief
Reverse transcriptase
Negatief

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
IMDM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820800a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Heruitplanten
Breng de celsuspensie over naar steriele centrifugebuisjes. Verzamel de cellen door ze gedurende 3 minuten bij 300xg te centrifugeren. Gooi het supernatant weg en breng de gepelleteerde cellen opnieuw in suspensie in vers celkweekmedium. Stel de optimale celdichtheid in op 1 - 3 x 105 cellen/ml. Splits de cellen wanneer een maximale celdichtheid van 1 - 2 x 106 cellen/ml is bereikt.
Vloeistofverversing
Om de 3 dagen
Herstel na ontdooiing
Laat de cellen minstens 24 uur bijkomen van het vriesproces.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
59 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch