Премини към съдържанието
Клетки NCI-H209
Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Дребноклетъчен карцином
Място на метастазите
Костен мозък
Синоними
H209, H-209, NCIH209

Документи

Клетки NCI-H209

Cell line · Номер на продукта 300183

Клетъчната линия NCI-H209 е получена от А.Ф. Газдар и колеги през 1979 г. от костния мозък на пациент с дребноклетъчен рак на белия дроб. Костният мозък...

€430.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

Изработва се по поръчка
1

01Обща информация

Описание
Клетъчната линия NCI-H209 е получена от A.F. Gazdar и сътрудници през 1979 г. от костния мозък на пациент с дребноклетъчен рак на белия дроб. Пробата от костен мозък е взета преди терапията. Линията е класическа клетъчна линия на SCLC, която експресира повишени нива на четири биохимични маркера (неврон-специфична енолаза, мозъчен изоензим на креатинкиназата, L-DOPA декарбоксилаза и бомбезин-подобна имунореактивност. ДНК последователностите на C-myc не се амплифицират. Не са открити груби структурни аномалии на ДНК. Това е клетъчна линия, която расте като големи агрегати в суспензия. Само агрегатите са жизнеспособни, но не може да се определи значим процент жизнеспособност. Средата обикновено съдържа големи количества клетъчни остатъци. Клетките експресират аберантна форма на RB1, която не е фосфорилирана, очевидно поради единична точкова мутация в кодон 706 (Cys-> Phe).
Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Дребноклетъчен карцином
Място на метастазите
Костен мозък
Синоними
  • H209
  • H-209
  • NCIH209

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Окачване
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, образува трансплантируеми тумори с типична хистология на SCLC в голи мишки

04Идентификатори

Източник
NCI-H209 (каталожен номер 300183 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_1525

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
P53 отрицателен
Изоензими
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, продукт на честотата на фенотипа = 0,0624
Продукти
Линията произвежда нормални количества р53 мРНК в сравнение с нормалния бял дроб.

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 x 105 клетки/мл
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
55 години
Етническа принадлежност
Кавказки