Gå direkte til indholdet
NCI-H209-celler
Væv
Lunge
Sygdom
Småcellet karcinom
Metastasested
Knoglemarv
Synonymer
H209, H-209, NCIH209

Dokumenter

NCI-H209-celler

Cell line · Varenummer 300183

NCI-H209-cellelinjen blev isoleret af A.F. Gazdar og kolleger i 1979 fra knoglemarven hos en patient med småcellet lungekræft. Knoglemarven...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse
NCI-H209-cellelinjen blev afledt af A.F. Gazdar og medarbejdere i 1979 fra knoglemarven hos en patient med småcellet lungekræft. Knoglemarvsprøven blev taget før behandlingen. Linjen er en klassisk SCLC-cellelinje, som udtrykker forhøjede niveauer af fire biokemiske markører (neuronspecifik enolase, hjerneisoenzym af kreatinkinase, L-DOPA-decarboxylase og bombesinlignende immunreaktivitet). C-myc DNA-sekvenser er ikke forstærket. Der blev ikke fundet nogen grove strukturelle DNA-abnormiteter. Dette er en cellelinje, der vokser som store aggregater i suspension. Kun aggregaterne er levedygtige, men der kan ikke måles nogen meningsfuld levedygtighedsprocent. Mediet vil normalt indeholde store mængder celleaffald. Cellerne udtrykker en afvigende form af RB1, som ikke er fosforyleret, tilsyneladende på grund af en enkelt punktmutation ved codon 706 (Cys-> Phe).
Væv
Lunge
Sygdom
Småcellet karcinom
Metastasested
Knoglemarv
Synonymer
  • H209
  • H-209
  • NCIH209

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, danner transplanterbare tumorer med typisk SCLC-histologi i nøgenmus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NCI-H209 (Cytion katalognummer 300183)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1525

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
P53 negativ
Isoenzymer
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Fænotypefrekvensprodukt = 0,0624
Produkter
Linjen producerer normale mængder af p53-mRNA i forhold til normale lunger.

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 105 celler/ml
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
55 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk