.jpg)
- Tissue
- ปอด
- Disease
- มะเร็งชนิดเซลล์เล็ก
- Metastatic site
- ไขกระดูก
- Synonyms
- H209, H-209, NCIH209
Documents
เซลล์ NCI-H209
Cell line · Product number 300183
The NCI-H209 cell line was derived by A.F. Gazdar and associates in 1979 from the bone marrow of a patient with small cell cancer of the lung. The bone marro...
Customization / Recommendations
- เซลล์ NCI-H209Cell line€430.00
01General information
- Description
- เซลล์ไลน์ NCI-H209 ถูกพัฒนาโดย A.F. Gazdar และคณะในปี 1979 จากไขกระดูกของผู้ป่วยที่เป็นมะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็ก ตัวอย่างไขกระดูกถูกเก็บก่อนการรักษาสายเซลล์นี้เป็นสายเซลล์คลาสสิกของ SCLC ซึ่งแสดงระดับที่สูงของตัวบ่งชี้ทางชีวเคมีสี่ชนิด (neuron specific enolase, brain isoenzyme of creatine kinase, L-DOPA decarboxylase และ bombesin-like immunoreactivity) โดยไม่พบการเพิ่มจำนวนของลำดับ DNA ของ C-mycไม่พบความผิดปกติของโครงสร้างดีเอ็นเอในระดับมหภาค สิ่งที่พบคือสายเซลล์ที่เจริญเติบโตเป็นกลุ่มก้อนขนาดใหญ่ในสภาพแขวนลอย เฉพาะกลุ่มก้อนเท่านั้นที่มีชีวิต แต่ไม่สามารถวัดเปอร์เซ็นต์ความมีชีวิตที่มีนัยสำคัญได้ สารอาหารจะมีเศษซากเซลล์จำนวนมากตามปกติ เซลล์เหล่านี้แสดงออกของโปรตีน RB1 ในรูปแบบที่ผิดปกติซึ่งไม่ถูกฟอสโฟรีเลต โดยคาดว่าเกิดจากการกลายพันธุ์จุดเดียวที่ตำแหน่งโคดอน 706 (Cys-> Phe)
- Tissue
- ปอด
- Disease
- มะเร็งชนิดเซลล์เล็ก
- Metastatic site
- ไขกระดูก
- Synonyms
- H209
- H-209
- NCIH209
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
- Tumourigenic
- ใช่, ก่อให้เกิดเนื้องอกที่สามารถปลูกถ่ายได้ซึ่งมีลักษณะทางจุลทรรศน์แบบ SCLC ทั่วไปในหนูเมาส์ที่ไม่มีภูมิคุ้มกัน
04Identifiers
- Citation
- NCI-H209 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300183)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1525
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- P53 เป็นลบ
- Isoenzymes
- G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, ความถี่ของฟีโนไทป์ = 0.0624
- Products
- สายการผลิตนี้สร้าง mRNA ของ p53 ในปริมาณปกติเมื่อเทียบกับปอดปกติ
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น
- Supplements
- เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
- Subculturing
- นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
- Seeding density
- 1 x 10⁵ เซลล์/มิลลิลิตร
- Fluid renewal
- 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง
เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน
- Freeze medium
- ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
- Storage conditions
สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น
- Shipping conditions
เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า
08Donor
- Donor age
- 55 ปี
- Ethnicity
- คอเคเชียน
09Legal and safety
- Safety precautions
- เมื่อวางแผนที่จะเก็บขวดแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อการละลายในอนาคต จำเป็นต้องปฏิบัติตามมาตรการความปลอดภัยอย่างเคร่งครัด การสวมถุงมือป้องกันและเสื้อผ้าที่เหมาะสมเป็นสิ่งจำเป็น และต้องใช้หน้ากากหรือแว่นตานิรภัยในระหว่างการถ่ายโอนตัวอย่างแช่แข็งไปยังหรือจากถังไนโตรเจนเหลว ทั้งนี้เพื่อลดความเสี่ยงจากการบาดเจ็บที่อาจเกิดจากการระเบิดของขวดแช่แข็งเมื่อนำออก ซึ่งอาจทำให้เศษแหลมคมกระเด็นออกมาได้
- Warranty
ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์
สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)
.jpg)
.jpg)
