Prejsť na obsah
Bunky NCI-H209
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Malobunkový karcinóm
Miesto metastáz
Kostná dreň
Synonymá
H209, H-209, NCIH209

Dokumenty

Bunky NCI-H209

Cell line · Číslo výrobku 300183

Buněčná línia NCI-H209 bola izolovaná A. F. Gazdarom a spolupracovníkmi v roku 1979 z kostnej drene pacienta s malobunkovým karcinómom pľúc. Kostná dreň...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na objednávku
1

01Všeobecné informácie

Popis
Bunkovú líniu NCI-H209 odvodil A. F. Gazdar a jeho spolupracovníci v roku 1979 z kostnej drene pacienta s malobunkovým karcinómom pľúc. Vzorka kostnej drene bola odobratá pred liečbou. Táto línia je klasickou bunkovou líniou SCLC, ktorá exprimuje zvýšené hladiny štyroch biochemických markerov (neurón špecifická enoláza, mozgový izoenzým kreatínkinázy, L-DOPA dekarboxyláza a imunoreaktivita podobná bombesínu. Sekvencie C-myc DNA nie sú amplifikované. Neboli zistené žiadne hrubé štrukturálne abnormality DNA. Ide o bunkovú líniu, ktorá rastie ako veľké agregáty v suspenzii. Len agregáty sú životaschopné, ale nie je možné zmerať významné percento životaschopnosti. Médium zvyčajne obsahuje veľké množstvo bunkových zvyškov. Bunky exprimujú aberantnú formu RB1, ktorá nie je fosforylovaná, zrejme v dôsledku jedinej bodovej mutácie v kodóne 706 (Cys-> Phe).
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Malobunkový karcinóm
Miesto metastáz
Kostná dreň
Synonymá
  • H209
  • H-209
  • NCIH209

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, vytvára transplantovateľné nádory s typickou histológiou SCLC u nahých myší

04Identifikátory

Citácia
NCI-H209 (katalógové číslo Cytion 300183)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1525

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
P53 negatívny
Izoenzýmy
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, produkt frekvencie fenotypov = 0,0624
Produkty
Línia produkuje normálne množstvo mRNA p53 v porovnaní s normálnymi pľúcami.

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 105 buniek/ml
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
55 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský