Przejdź do treści
Komórki NCI-H209
Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak drobnokomórkowy
Miejsce przerzutów
Szpik kostny
Synonimy
H209, H-209, NCIH209

Dokumenty

Komórki NCI-H209

Cell line · Numer produktu 300183

Linia komórkowa NCI-H209 została wyhodowana przez A.F. Gazdara i współpracowników w 1979 roku ze szpiku kostnego pacjenta z drobnokomórkowym rakiem płuca. Szpik kostny...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

Wykonane na zamówienie
1

01Informacje ogólne

Opis
Linia komórkowa NCI-H209 została uzyskana przez A.F. Gazdara i współpracowników w 1979 roku ze szpiku kostnego pacjenta z drobnokomórkowym rakiem płuc. Próbka szpiku kostnego została pobrana przed leczeniem. Linia ta jest klasyczną linią komórkową SCLC, która wykazuje podwyższony poziom czterech markerów biochemicznych (enolazy swoistej dla neuronów, izoenzymu mózgowej kinazy kreatynowej, dekarboksylazy L-DOPA i immunoreaktywności podobnej do bombezyny). Sekwencje DNA C-myc nie uległy amplifikacji. Nie wykryto żadnych poważnych strukturalnych nieprawidłowości DNA. Jest to linia komórkowa, która rośnie jako duże agregaty w zawiesinie. Tylko agregaty są żywotne, ale nie można zmierzyć znaczącego procentu żywotności. Pożywka zwykle zawiera duże ilości resztek komórkowych. Komórki wyrażają nieprawidłową formę RB1, która nie jest fosforylowana, najwyraźniej z powodu pojedynczej mutacji punktowej w kodonie 706 (Cys-> Phe).
Chusteczka
Płuco
Choroba
Rak drobnokomórkowy
Miejsce przerzutów
Szpik kostny
Synonimy
  • H209
  • H-209
  • NCIH209

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, tworzy przeszczepialne guzy o typowej histologii SCLC u nagich myszy

04Identyfikatory

Źródło
NCI-H209 (numer katalogowy Cytion 300183)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1525

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
P53 ujemny
Izoenzymy
G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, iloczyn częstości fenotypów = 0,0624
Produkty
Linia produkuje normalne ilości mRNA p53 w stosunku do normalnych płuc.

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 105 komórek/ml
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
55 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski