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- Tecido
- Pulmão
- Doença
- Carcinoma de pequenas células
- Local da metástase
- Medula óssea
- Sinónimos
- H209, H-209, NCIH209
Documentos
Células NCI-H209
Cell line · Número do produto 300183
A linha celular NCI-H209 foi isolada por A.F. Gazdar e colaboradores em 1979 a partir da medula óssea de um doente com cancro do pulmão de pequenas células. A medula óssea...
Personalização / Recomendações
- Células NCI-H209Cell line€430.00
01Informações gerais
- Descrição
- A linha celular NCI-H209 foi obtida por A.F. Gazdar e colaboradores em 1979 a partir da medula óssea de um doente com cancro do pulmão de pequenas células. A amostra de medula óssea foi recolhida antes da terapia. Trata-se de uma linha celular clássica de SCLC que exprime níveis elevados de quatro marcadores bioquímicos (enolase específica dos neurónios, isoenzima cerebral da creatina quinase, L-DOPA descarboxilase e imunorreactividade do tipo bombesina). As sequências de ADN C-myc não foram amplificadas. Não foram detectadas anomalias estruturais grosseiras do ADN. Esta é uma linha celular que cresce como grandes agregados em suspensão. Apenas os agregados são viáveis, mas não é possível medir uma percentagem significativa de viabilidade. O meio conterá normalmente grandes quantidades de detritos celulares. As células expressam uma forma aberrante de RB1 que não é fosforilada, aparentemente devido a uma mutação pontual única no códão 706 (Cys-> Phe).
- Tecido
- Pulmão
- Doença
- Carcinoma de pequenas células
- Local da metástase
- Medula óssea
- Sinónimos
- H209
- H-209
- NCIH209
02Classificação
- Organismo
- Humano
- Sexo
- Masculino
- Propriedades de crescimento
- Suspensão
- Nível de biossegurança
- 1
03Características
- Morfologia
- De tipo epitelial
- Tumorigénico
- Sim, forma tumores transplantáveis com histologia típica de CPPC em ratinhos nus
04Identificadores
- Referência
- NCI-H209 (número de catálogo Cytion 300183)
- Número de identificação fiscal do NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1525
05Expressão e suscetibilidade
- Expressão proteica
- P53 negativo
- Isoenzimas
- G6PD, B, PGM1, 1-2, PGM3, 1, ES-D, 1, Me-2, 0, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, Produto de frequência fenotípica = 0,0624
- Produtos
- A linha produz quantidades normais de ARNm do p53 em relação ao pulmão normal.
06Manuseamento e cultura
- Meio de cultura
- RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
- Atmosfera de incubação
37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.
- Suplementos
- Completar o meio com 10% de FBS
- Subcultura
- Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
- Densidade de sementeira
- 1 x 105 células/mL
- Renovação de fluidos
- 2 a 3 vezes por semana
- Descongelamento e cultura
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Controlo de qualidade e criopreservação
- Esterilidade
A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.
Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.
- Meio de congelação
- Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
- Condições de armazenamento
Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.
- Condições de envio
As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.
08Doador
- Idade do dador
- 55 anos
- Etnia
- Caucasiano
09Aspectos legais e de segurança
- Precauções de segurança
- Quando se planeia armazenar um criovial em nitrogénio líquido para descongelação futura, é obrigatório aderir a medidas de segurança rigorosas. Luvas e vestuário de proteção adequados são essenciais, e a utilização de uma máscara facial ou óculos de segurança é necessária durante a transferência de amostras congeladas para ou do tanque de nitrogénio líquido. Isto destina-se a mitigar o risco de ferimentos provocados por potenciais explosões de crioviais após a remoção, que podem resultar na projeção de fragmentos afiados.
- Garantia
Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto
Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia
- É necessário um Acordo de Transferência de Material
- Sim
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